不同冷冻保护剂对冷冻保存大鼠皮肤活性的影响

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目的:冷冻保存是皮肤移植研究中的一项重要技术,在保存过程中使用冷冻保护剂可以预防组织细胞受到低温损伤。本研究比较三种不同的冷冻保护剂对冷冻保存大鼠皮肤活性的影响,寻求一种最佳的冷冻保护剂,为低温冷冻保存皮肤的临床应用提供依据。方法:选用健康的雄性Wistar大鼠,取其新鲜皮肤组织分成三组,分别用海藻糖/二甲基亚砜(Ⅰ组),丙二醇/二甲基亚砜(Ⅱ组),乙酰胺/二甲基亚砜(Ⅲ组)冷冻保护剂预处理10、20、30、40、50、60mmin。对照组(Ⅳ组)不使用冷冻保护剂。将对照组和实验组密封在塑料包装中并做好标记,-26℃保存24h,-80℃保存14d。将冷冻保存后的大鼠皮肤快速复温,采用琥珀酸脱氢酶测定法测定大鼠皮肤的活性。结果:实验Ⅰ组的大鼠皮肤活性优于其他三组,经统计学方法检验分析,各组之间的差异具有统计学意义(P<0.05)。大鼠皮肤活性随冷冻保护剂预处理时间的延长逐渐升高,在30mmin时达到峰值然后逐渐下降,60mmin以后低于对照组。结论:海藻糖/二甲基亚砜冷冻保护剂对冷冻保存大鼠皮肤活性的保护作用优于丙二醇/二甲基亚砜和乙酰胺/二甲基亚砜。冷冻保存前预处理30mmin能达到最佳的保护效果。
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