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西瓜食酸菌（Acidovorax citrulli）能够侵染甜瓜等作物引起果斑病（Bacterial Fruit Blotch,BFB）,Ⅲ型分泌系统（Type Three Secretion System, TTSS）在其侵染寄主的过程中发挥关键作用。如果TTSS功能受到抑制,A. citrulli的致病性会明显减弱甚至完全丧失。本研究将TTSS作为药剂作用靶点,构建了筛选TTSS抑制剂的报告载体、明确了A. citrulli MH21中TTSS的诱导条件,建立了TTSS抑制剂高通量筛选体系。完成了对12000个化合物筛选试验,发现了对TTSS有抑制作用的丙二腈肟醚类化合物,并且对该类化合物开展了甜瓜果斑病温室防效、hrp/hrc基因表达qRT-PCR检测、构效关系分析等研究。将食酸菌Ⅲ型分泌系统效应子Aave3502 （Pseudomonas syringae中TTSS Effector蛋白HopAO1同源蛋白）的N端信号肽和β-内酰胺酶基因翻译融合构建报告载体,转化A. citrulli MH21野生型及TTSS突变体。利用胞外p-内酰胺酶水解头孢硝噻吩导致的颜色变化来判断TTSS是否正常发挥功能。采用上述报告体系,系统检测了TTSS诱导培养基、培养温度、培养基酸碱度、离子浓度等条件,最终确定pH5.8以及含有10 mM镁离子的LB培养基能够诱导西瓜食酸菌TTSS表达。在此基础上,建立了以96孔细胞培养板为载体、TTSS效应物信号肽融合β-内酰胺酶为报告的TTSS抑制剂高通量筛选体系。通过对12000个人工合成化合物的初筛,发现了463个可能有抑制TTSS活性的化合物,其中的丙二腈肟醚类化合物对TTSS的抑制作用明显优于其他化合物。构效分析结果表明,2个丙二腈肟醚取代基团位于苯环对位的化合物活性较高,用卤素或者硝基替换其中一个丙二腈肟醚结构,能够进一步提高化合物的抑制活性。活体试验中,部分丙二腈肟醚类化合物对A. citrulli MH21在植物体上的侵染发病有明显的抑制作用,化合物33962对甜瓜果斑病的防效达到80%以上。采用qRT-PCR技术对经过丙二腈肟醚类化合物处理的菌株进行检测,发现TTSS编码基因簇hrp/hrc中的保守基因hrcU、hrcC、hrcJ,外泌装置基因hrpE以及泌出物基因hopDl的表达量有明显影响,部分基因的表达量减少80%以上。综合各阶段研究结果进行分析,丙二腈肟醚类化合物有很大可能性是一种新的TTSS抑制剂。本研究发现的丙二腈肟醚类TTSS抑制剂,可以通过对病原细菌关键致病系统的抑制作用发挥其防病效果。由于该类化合物与传统细菌病害防治药剂作用机制完全不同,因此对于病原细菌的抗药性治理和病害防治具有积极意义。