【摘 要】
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采用机械分离方法分离未成熟小鼠腔前卵泡用于腔前卵泡体外发育和体外排卵的研究.以α-MEM加亚硒酸钠(4.4ng/mg),维生素C(50μg/ml)、L-谷氨酰胺(2mmol/l)、丙酮酸钠(0.23mmo
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采用机械分离方法分离未成熟小鼠腔前卵泡用于腔前卵泡体外发育和体外排卵的研究.以α-MEM加亚硒酸钠(4.4ng/mg),维生素C(50μg/ml)、L-谷氨酰胺(2mmol/l)、丙酮酸钠(0.23mmol/l)为基础培养液,再加10﹪的四种不同来源的血清和1μg/ml FSH用于腔前卵泡的培养,以评价血清和FSH对卵泡发育的影响.把10~25枚腔前卵泡接种于100~150μl微滴中,上盖石蜡油,在5﹪CO<,2>,饱和湿度,37℃条件下培养9~10天.隔天换液一次,每天观察卵泡体外发育情况,测定卵泡和卵母细胞大小.培养结束时,用10iu/ml hCG进行体外诱导排卵,并把部分卵母细胞用于体外受精,经体外培养后观察胚胎的发充能力.在该实验条件下,用机械分离法采集的小鼠腔前卵泡能够发育至成熟排卵;卵母细胞能够生长发育到成熟时大小,并能够恢复成熟分裂.
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