背景：　　 再生障碍性贫血（aplastic anemia,AA）是一种自身反应性T淋巴细胞攻击靶器官骨髓所致的骨髓衰竭性疾病。CD4+CD25+调节性T细胞(Tregs)可通过抑制自身反应性T淋巴细胞进而控制自身免疫性疾病的发生发展。CD4+CD25+Tregs缺陷致其抑制自身反应性T淋巴细胞增殖及分泌细胞因子的能力下降，进而导致自身免疫性疾病的发生发展，已有研究证实其在多种自身免疫性疾病中存在缺陷，但其在AA发病机制中的作用尚未明确。　　 目的：　　 本研究旨在检测AA患者CD4+CD25+Tregs数量是否减少、功能是否缺陷，探讨其在AA发病机制中的作用，为AA的免疫抑制治疗提供新的方向。　　 方法：　　 (1)采用Ficoll密度梯度离心法分离外周血和骨髓单个核细胞（PB/BMMNC）；　　 (2)流式细胞术检测PB与BMCD4+CD25+Tregs比率；　　 (3)免疫磁珠分选法(MACS)分选CD4+CD25+Tregs，CD4+CD25-反应性T细胞(Tresp)和CD8+细胞毒性T细胞(Tcyt)；　　 (4)采用Transwell检测CD4+CD25+Tregs迁移能力；　　 (5)Real-time PCR方法检测PB和BMCD4+CD25+Tregs上CXCR4和CXCR7 mRNA表达水平；　　 (6)流式细胞术(FACS)检测PBCD4+CD25+Tregs上CXCR4表达水平；　　 (7)酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清与骨髓上清中SDF-1α水平；　　 (8)建立Tregs与自身Tresp或Tcyt共培养体系，用Brdu ELISA kit检测Tresp和Tcyt增殖情况以及Tregs对Tresp或Tcyt增殖抑制能力；　　 (9)建立AA患者Tregs与正常对照Tresp或Tcyt以及正常对照Tregs与AA患者Tresp或Tcyt的交叉培养体系，检测AA患者Tregs本身是否存在缺陷；　　 (10)ELISA方法检测体外共培养上清IFN-γ；　　 (11)MACS分选脐血来源CD34+细胞，通过甲基纤维素半固体培养基(H4434)中加入体外共培养体系获得的上清，比较AA患者和正常对照Tregs改善造血克隆形成的能力。　　 结果：　　 (1)AA患者PB和BMCD4+CD25+Tregs比率均低于正常对照组；　　 (2)AA患者PBCD4+CD25+Tregs迁移能力低于正常对照组，且与疾病严重程度密切相关；　　 (3)AA患者PB和BMCD4+CD25+Tregs CXCR4基因水平的表达均低于正常对照组，而CXCR7基因水平无显著差异；　　 (4)AA患者PBCD4+CD25+Tregs CXCR4蛋白水平的表达低于正常对照组；　　 (5)AA患者血清与骨髓上清中SDF-1α的水平与正常对照组无显著差异；　　 (6)AA患者骨髓上清与正常对照组相比，对PBCD4+CD25+Tregs的趋化能力无显著差异；　　 (7)AA患者PB和BM Tresp或Tcyt增殖能力均较正常对照组显著增强；　　 (8)AA患者PB和BM Tregs抑制自身Tresp或Tcyt增殖能力较正常对照组显著降低；　　 (9)正常对照PB Tregs可抑制AA患者PB Tresp或Tcyt增殖，而AA患者Tregs抑制Tresp或Tcyt增殖能力显著下降；　　 (10)AA患者PB和BM Tresp或Tcyt产生IFN-γ的能力显著高于正常对照组；　　 (11)AA患者PB和BM Tregs抑制Tresp或Tcyt产生IFN-γ的能力显著低于正常对照组；　　 (12)AA患者Tresp或Tcyt体外培养上清可明显抑制造血克隆形成；　　 (13)AA患者Tregs改善造血克隆形成能力显著低于正常对照组。　　 结论：　　 (1)AA患者CD4+CD25+Tregs数量减少；　　 (2)AA患者CD4+CD25+Tregs迁移、抑制Tresp或Tcyt增殖、抑制Th1细胞因子产生和改善造血的能力均存在缺陷；　　 (3)CD4+CD25+Tregs自身缺陷，而非自身反应性T淋巴细胞抵抗增强在AA发病机制中起主导作用；　　 (4)基于CD4+CD25+Tregs的免疫抑制治疗策略可更有效治疗AA。