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离子梯度法是提高两亲性水溶性药物脂质体包封率的常用方法之一。本试验根据离子梯度载药法“质子池”和药物在脂质体内水相形成低溶解性聚集物的机理,采用盐酸阿霉素(Doxorubicin Hydrochloride, DOX)为模型药物,利用不同水化介质建立不同跨膜梯度,以得到包封率高、稳定性好的脂质体制剂。处方前研究中,建立了2,5-二羟基苯磺酸铵(NH4BS)和乙二胺四乙酸铵(NH4EDTA)的反相离子对高效液相色谱(IP-HPLC)体外分析方法,方法准确、可信,为DOX脂质体的制剂评价、质量控制奠定基础。比较了葡聚糖凝胶微柱法和离子交换树脂微柱法测定DOX脂质体包封率,选择阳离子交换树脂微柱法作为包封率测定方法。以平均粒径、包封率和4℃的放置稳定性为评价指标,通过对脂质体制备方法、水化介质种类、处方比例、磷脂种类、PEG2000胆固醇琥珀酸酯(mPEG2000-CHEMS)加入量、pH调节剂、pH值、水化介质浓度、载药条件等方面的筛选,优化DOX脂质体处方为氢化大豆磷脂：胆固醇：mPEG2000-CHEMS=3：1：1,水化介质为150-200mmol·L-1 NH4EDTA溶液,优化透析法建立跨膜梯度。测定了DOX在不同水化介质中的溶解度及不同跨膜梯度制得的DOX脂质体的释放度。结合包封率、释放度、DOX脂质体和跨膜梯度的稳定性研究等实验结果,总结了DOX溶解度对脂质体包封率的影响,并针对NH4EDTA跨膜梯度法制备DOX脂质体的机理进行了初步探讨,首次提出除“质子池”和药物在脂质体内水相形成低溶解性聚集物的脂质体载药机理外,NH4EDTA跨膜梯度中还存在“铵离子池”。建立异位皮下移植H22细胞小鼠肝肿瘤模型,对NH4EDTA和(NH4)2S04梯度制得的DOX脂质体的体内抗肿瘤作用进行研究,并考察了DOX在荷瘤小鼠各组织内的分布情况。结果表明不同跨膜梯度对DOX脂质体的抑瘤作用无显著影响,但NH4EDTA跨膜梯度制得DOX脂质体可以更稳定地释放药物,在肿瘤组织内维持更高的DOX浓度。