MnCl对体外培养Leydig细胞P450scc、3β-HSD的影响

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目的:探讨锰对体外培养Leydig细胞P450scc、3β-HSD的影响。方法:建立体外培养大鼠Leydig细胞的原代培养方法,染锰(0、10、30、100μmol/L)24h后,原子吸收光谱法检测细胞内外锰的含量,ELISA方法检测细胞培养上清液中睾酮、P450scc、3β-HSD及细胞内P450scc、3β-HSD的含量,并运用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)的方法检测Leydig细胞P450scc、3β-HSDmRNA的表达水平。结果:与对照组相比,在设计剂量范围内,随着染锰剂量加大,细胞培养上清液中睾酮及细胞内Mn的含量逐渐增加,30、100μmol/L时,有统计学意义,P<0.05。细胞内外P450scc含量不断增加,30、100μmol/L,细胞内该酶的增加有统计学意义,P<0.05;10、30、100mol/L,细胞外该酶的增加有统计学意义,p<0.05。P450sccmRNA的表达水平升高,100μmol/L时,有统计学意义,p<0.05。细胞内外3β-HSD的含量及3β-HSDmRNA的表达水平均在染锰10μmol/L时升高,之后不断降低,100μmol/L时,有统计学意义(p<0.05)。结论:100μmol/L以下时,MnCl2急性接触可能主要通过影响P450scc基因表达及蛋白合成,促进体外培养Leydig细胞合成睾酮。
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