突触相关蛋白SYN及GAP-43在维生素D缺乏致大鼠学习记忆功能障碍的作用研究

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目的:研究血管性痴呆与维生素D之间的关系;观察维生素D(VitD)缺乏模型大鼠突触相关蛋白突触素(synaptophysin,SYN)及神经生长相关蛋白43(growth-associatedprotein-43,GAP-43)的表达及维生素D对其表达的影响,探讨维生素D对大鼠学习记忆能力的作用及其对突触可塑性的影响。方法:1.临床研究:部分采用平行、随机、对照实验方案,选择柳州市中医院2014年12月至2015年12月之间,纳入符合血管性痴呆诊断标准患者30例以及健康体检中心正常者60例,比较两组血清25(OH)D3水平。2.实验研究:根据李清华等方法,将50只SD大鼠随机分为对照组(Control group,n=10)给予普通饲料,模型组即维生素D缺乏组((Model group,n=10)、低剂量治疗组(Low dose group,n=10)、中剂量治疗组(Middle dose group,n=10)、高剂量治疗组(High dose group,n=10)给予维生素D缺乏饲料饲养9周,光照采用无紫外线光的白炽灯,昼夜节律12小时/12小时。在第10周开始予以维生素D补充剂灌胃2周,第13周采用Morris水迷宫试验检测大鼠的学习及记忆能力,并在规定的时间段内处死大鼠取其脑组织。采用ELISA法检测1,25DHVD3水平;Western blot检测SNY和GAP-43蛋白表达。所得数据采用SPSS23.0统计学分析软件,数据采用均数±标准差()表示,两样本均数间比较采用t检验,组间比较用单因素方差分析(one-way ANOVA)。方差齐时采用LSD法,方差不齐采用Dunnett’s T3法,以p<0.05为差异有统计学意义。结果:1.临床研究:与对照组比较,VaD组血清25(OH)D3降低(p<0.05);2.行为学测试:在训练第2、3、4、5天中,与对照组比较,模型组逃避潜伏期长(p﹤0.05)。与对照组比较,模型组第1次穿越目标象限(第三象限)时间、目标象限(第三象限)穿越次数均有显著差异(p﹤0.05)。与模型组比较,高剂量组第2天逃避潜伏期有统计学意义(p﹤0.05)。高剂量组和模型组仅仅在目标象限(第三象限)穿越次数上存在显著差异(p﹤0.05)。3.SNY和GAP-43表达:与空白组对照比较,模型组SYN蛋白表达升高(p﹤0.05);与模型组比较,高剂量组SYN蛋白表达均升高(p<0.05);与空白组对照组比较,模型组GAP-43蛋白表达升高(p<0.05);与模型组比较,高剂量组GAP-43蛋白表达均升高(p<0.05)。结论:1.VaD患者血清25(OH)D3水平降低。2.维生素D缺乏会造成大鼠学习记忆能力减退。3.长时间补充维生素D可能有益于突触重塑,可以改善维生素D缺乏大鼠的学习及记忆能力。4.维生素D改善大鼠学习及记忆能力的作用,可能与增加突触相关蛋白SNY及GAP-43蛋白的表达有关。
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