【摘 要】
:
核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)能够侵染多种寄主植物,是一种典型的死体营养型植物病原真菌。核盘菌引起的菌核病在世界范围能够对各类经济作物造成巨大损失。本研究以核盘菌的糖代谢途径为目标,研究核盘菌半乳糖尿苷酰转移酶SsGALT1基因功能,并构建寄主PR蛋白VIGS载体,探索PR蛋白的诱导调控。主要研究结果:1.核盘菌SsGALT1蛋白生物信息学与表达分析。核盘菌SsGALT
【基金项目】
:
辽宁省“兴辽英才计划”项目(XLYC1807242)LL00; 辽宁省高校基础研究项目(LSNJC201914); 沈阳农业大学引进人才科研启动项目(20153040);
论文部分内容阅读
核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)能够侵染多种寄主植物,是一种典型的死体营养型植物病原真菌。核盘菌引起的菌核病在世界范围能够对各类经济作物造成巨大损失。本研究以核盘菌的糖代谢途径为目标,研究核盘菌半乳糖尿苷酰转移酶SsGALT1基因功能,并构建寄主PR蛋白VIGS载体,探索PR蛋白的诱导调控。主要研究结果:1.核盘菌SsGALT1蛋白生物信息学与表达分析。核盘菌SsGALT1蛋白由382个氨基酸组成,无跨膜螺旋,无信号肽剪切位点,可能为亲水性分泌蛋白。核盘菌SsGALT1基因在真菌生长发育及致病过程中表现差异性表达。其中,SsGALT1基因在侵染早期(48 h)及成熟过程中(72 h)表达量较前一时间点升高。2.核盘菌SsGALT1基因缺失突变体构建。利用原生质体转化等方法,通过pCX62载体介导的SsGALT1基因同源重组技术,经PCR验证表明目的基因SsGALT1片段被潮霉素基因成功替换,获得核盘菌SsGALT1基因缺失突变体。3.核盘菌SsGALT1基因的表型分析。核盘菌SsGALT1基因缺失影响生长发育,表现为与野生型相比,mut1菌丝生长迟缓约5.5%,,mut2菌丝生长迟缓约50%,菌核成熟期(8 d)未产生成熟菌核,草酸分泌未受影响,但致病力下降约54.5%。4.核盘菌致病过程中诱导寄主PR蛋白调控。核盘菌侵染寄主后,寄主PR表达水平发生改变。其中,与未侵染健康植物相比,PR1表达显著上调40倍以上,PR5在侵染后期(72 h)表达上调约6倍,PR10表达量稳定。通过构建寄主PR蛋白VIGS载体,并转化至寄主植物。核盘菌接种转化的番茄和向日葵,其抗性分别下降约79.9%和21.4%,表明核盘菌侵染过程中能够诱导寄主PR蛋白表达调控。本研究探讨了碳源代谢相关基因SsGALT1对核盘菌生长发育与致病的影响,利用VIGS体系发现核盘菌致病过程中诱导寄主PR蛋白调控,为后续探索核盘菌碳源代谢基因功能及PR蛋白调控作用提拱了理论依据。
其他文献
从紫穗槐果实中分离提取得到主要杀虫活性成分Amorphigenin,化学分类上属于拟鱼藤酮类化合物,室内生物测定结果表明其对菜青虫幼虫、小菜蛾、苹果黄蚜、淡色库蚊幼虫均有毒杀作用,先前研究表明其对淡色库蚊的线粒体复合酶Ⅰ具有抑制作用。已有的研究表明真核生物线粒体复合酶Ⅰ具有44个不同的亚基,而原核细胞中仅有14个亚基就可以正常行使线粒体复合酶Ⅰ的功能,因此这14个亚基被认为是线粒体复合酶Ⅰ的关键亚
日粮芳香族氨基酸(色氨酸、苯丙氨酸和酪氨酸)对动物的生长、代谢具有重要作用,但同时它们也是吲哚类、酚类等臭气化合物产生的主要前体物质。研究表明,日粮添加水苏糖显著降低了肉仔鸡盲肠臭气化合物的产生。本试验旨在研究日粮可消化芳香族氨基酸(d AAA)水平、水苏糖及其互作效应对肉仔鸡生产性能、盲肠臭气化合物浓度的影响及其作用机制,为合理配制日粮和臭气化合物减排提供科学参考。试验采用3×2两因素析因设计,
非洲爪蟾(Xenopus laevis)是一种成熟的模式生物,它的各项研究一直都被广泛关注。最早由Nieuwkoop和Faber在1956年建立了野生型非洲爪蟾的胚胎发育标准表,但该标准表缺少实图和部分时期四肢形态发育的细节描述,这对于非洲爪蟾四肢和骨骼发育方面的深入研究来说是不够的。而且白化品种色素沉着少的特点让它在进行组织化学实验操作时更简便,例如在原位杂交试验中可以观察到更明显的信号。因此,
油菜菌核病和番茄灰霉病都会严重危害蔬菜水果等农作物的产量。化学农药是目前主要防治油菜菌核病和番茄灰霉病的手段,但是抗药性问题在近几年愈发严重。本试验以油菜菌核病和番茄灰霉病为主要的防治靶标,合成六氢-2H-苯并[e][1,2,4]噻二嗪-3(4H)-酮-1,1-二氧化物类化合物30个,将烷基、苯基、苄基和苯乙基等官能团连接到噻二嗪2位,利用~1H NMR、13C NMR和HRMS的检测手段,确认目
烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)和马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)是许多经济作物上的重要病毒,但现有防治TMV和PVY的农药种类较少且效果不佳。相比于化学防治,TMV和PVY的生物防治具有低毒、低残留且对环境友好的特点更加满足农业生产的需求,其中利用微生物代谢物质防治植物病毒病害是一个重要的研究热点。本论文利用链霉菌对此开展了深入研究,取得了主要
大豆疫霉(Phytophthora sojae)引起的大豆根腐病(Phytophthora root rot,PRR)在我国东北和黄淮海等区域广泛发生并造成严重经济损失。大豆抗性丧失,大豆疫霉抗药性出现,病害的防控更加困难,亟需发掘新的防控靶标,筛选化学抑制剂。类异戊二烯(isoprenoids)是生物中最为丰富的次级代谢产物,异戊烯转移酶催化前体异戊烯焦磷酸(isopentenyl diphos
鸡(Gallus gallus)是研究禽类发育生物学的重要模式生物,且以家鸡为代表的陆生鸟类胚胎发育过程中脚蹼趾间组织的凋亡是研究生理性细胞凋亡的经典模型。但是,由于禽类种类繁多,陆禽和水禽的蹼足在形态上存在较大的差异,因此鸡胚的脚蹼发育研究并不适合用作鸭等水禽胚胎脚蹼发育的参考模型。本试验先后分4批孵化了总共1000枚鸡、鸭种蛋,对应脚蹼的发育分化时期(Stage26-35),收集鸡鸭胚胎做形态
在当前我国社会发展阶段,建筑施工工作在开展和实施中,所呈现出的建设难度相对较大,经常会有一些安全隐患和特大安全事故的发生,这也影响了其整体工程施工质量效果的提升,为国家的人民生命财产造成了较大的威胁。所以加强质量管理的监督控制成为了其中的重中之重,文章结合水利工程的施工工作开展情况,重点分析其质量控制的具体实施方法,在了解其中常见问题的情况下,结合某河水库的工程施工案例,分析其具体的问题解决策略,
小鼠(Mus musculus)是研究哺乳动物的模式生物,在生命科学研究中起到非常重要的作用。在以往的研究中,研究人员将交配次日检测到阴道栓的中午定为胚期第0.5天(E0.5),但实际的交配时间及其后的受精时间会有数小时乃至十几小时的差异,这导致其胚胎发育分期不够准确。目前还没有研究对小鼠骨骼发育进行全面准确的描述。本研究对约700只ICR小鼠的交配过程进行红外摄像,根据监控确定小鼠交配的时间(E
本研究通过两个试验探讨了日粮中单独和同时添加过瘤胃半胱氨酸(rumen-protected cysteine,RPCys)与过瘤胃蛋氨酸(rumen-protected methionine,RPMet)对辽宁绒山羊生长性能、养分消化、血液指标和产绒性能相关指标的影响。试验一:采用人工唾液法、半体内尼龙袋法和体外模拟小肠消化法分别测定RPCys与RPMet在唾液、瘤胃和小肠中的降解率。结果表明RP