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约20年前,人们在蓝藻类囊体膜上发现了一种新型的光合膜蛋白复合体,称之为NADPH脱氢酶复合体(NDH-1)。到目前为止,人们已发现NDH-1复合体至少由18种亚基(NdhA-S)组成。其中ndhK基因与ndhC和ndhJ基因位于同一操纵子中。ndhK基因可受到高光、低碳等条件的强烈诱导而迅速大量转录表达,这意味着ndhK基因拥有一个可快速响应外界环境变化而调节基因表达的启动子,但该启动子的结构与功能尚不清楚。为了解ndhK基因启动子的结构与功能,我们首先采用5’RACE的方法将ndhK基因的转录起始位点定位于其起始密码子(ATG)上游160bp的T碱基处,并利用生物信息学分析手段,对该基因上游可能的调控序列区域进行分析,找到了四个可能的启动子核心区域。接着构建了一个能在大肠杆菌中进行启动子片段活性快速检测的探针型载体,根据上述信息学预测结果,设计了一系列的启动子删除分析片段,插入到启动子探针型载体中,再通过蛋白免疫方法对ndhK基因的启动子及其调控区域进行详细分析。通过分析发现在集胞藻6803中ndhK基因上游存在四个具在较高启动子活性的区域,分别是-374～-274bp,-438～-374bp,-604～-543bp,+1～+52bp,而在-543～-440bp区域则可能存在一个抑制ndhK基因表达的转录因子。为进一步验证构建的大肠启动子活性快速检测平台的准确性,我们利用pPT6803-1载体,将经上述分析后的一些启动子删除分析片段整合入野生集胞藻6803中,并对各转基因藻中报告基因LuxAB的发光量进行了定量检测并分析,实验结果表明,各转基因藻中LuxAB的发光量与大肠启动子活性快速检测平台所确定的启动子片段活性存在显著正相关性,从而证明大肠启动子活性快速检测平台的准确性。综上所述,我们找到了集胞藻6803中ndhK基因的转录起始位点；构建了一个能在大肠杆菌中快速检测启动子片段活性的启动子探针型载体。并利用该平台对集胞藻6803中ndhK基因上游的启动子区域进行分析,初步确定了该基因启动子的结构与功能。最终还通过转基因藻中报告基因的表达情况,对大肠启动子活性快速检测平台的准确性进行肯定。