文冠果壳黄酮、皂苷提取及功能研究

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文冠果是我国特有的油用、药用作物,种仁广泛用于开发生物柴油。废弃果壳含有黄酮、皂苷、香豆素、甾醇、脂肪酸等多种活性物质,对这些活性成分研究具有重大的经济价值和社会效益。通过对文冠果壳黄酮、皂苷分离纯化工艺的研究得到:乙醇提取法较水提取更为有效,所得文冠果壳黄酮质量分数为2.15%,文冠果壳皂苷质量分数为2.5%;黄酮纯化选用X-5型大孔树脂,皂昔选用AB-8型大孔树脂。中高压制备色谱大孔树脂纯化工艺参数为:洗脱剂:乙醇/水,流速:15 mL/min,检测波长:254、280、310、365 nm,梯度洗脱。文冠果壳黄酮纯化后收集180-200 mmin主峰,测得纯度为90.5%。AB-8大孔树脂纯化得文冠果壳皂苷纯度为94.67%。文冠果壳黄酮、皂苷的抗自由基实验研究表明,文冠果壳黄酮、皂苷均具有一定的抗自由基能力,其中抗羟基自由基的能力明显高于同浓度下的抗坏血酸。文冠果壳皂苷抑菌实验结果表明,文冠果壳皂苷对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌有抑制效果,IC50分别为0.494.0.366 μg/mL。通过对酪氨酸酶催化L-多巴氧化速度的测定研究了文冠果壳黄酮、皂苷对体外酪氨酸酶活性的抑制作用。结果表明,文冠果壳黄酮、皂苷对酪氨酸酶都具有抑制作用。黄酮浓度为0.48 mg/mL时,抑制率最高可达45.1%,抑制类型为混合型抑制,Km=1.05 mg/mL。皂苷浓度为0.36 mg/mL,抑制率可达到64.6%,抑制类型为非竞争性抑制,KM=1.25 mg/mL。文冠果壳黄酮、皂苷体外抑制猪胰脂肪酶的实验结果表明,二者均能抑制胰脂肪酶活性。文冠果壳黄酮浓度为0.27 mg/mL时抑制率为75%。文冠果壳皂苷对胰脂肪酶的最高抑制率达87.5%。酶蛋白分子的紫外、荧光色谱研究显示,文冠果壳黄酮皂苷通过改变酶分子构象而影响酶的活性。采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法,以文冠果壳黄酮、皂苷为药物对胃癌细胞MGC-803增殖抑制作用进行了测定。结果表明:文冠果壳黄酮、皂苷对胃癌细胞MGC-803均有一定的抑制作用,随着样品浓度的升高,抑制作用增强。文冠果壳黄酮浓度为500 μg/mL时,抑制率最高,达38.5%。文冠果壳皂苷500 μg/mL时,抑制率为36.79%。
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