论文部分内容阅读
目的星形胶质细胞是中枢神经系统中最多的细胞类型,约占正常成年人脑细胞总数的40%,在提供中枢神经系统代谢和营养支持、维持正常神经元的功能、调节突触等活性方面等方面发挥重要作用。胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein, GFAP)是脑内成熟星形胶质细胞主要的中间纤维蛋白,是细胞骨架蛋白,大量的GFAP在星形细胞中有丰富而特异性的表达,是星形细胞活化的的标志蛋白。局灶性脑缺血后缺血中心区、缺血半暗带区的GFAP的变化已引起人们的广泛关注并有了深入研究,近几年缺血后远隔区部位GFAP的变化也引起人们广泛的关注。临床研究和动物实验表明,脑梗死损害并不仅仅限于梗死灶局部,急性期过后神经系统远离梗死灶的相关部位也会发生继发性损害。本实验的目的观察右侧大脑中动脉闭塞后远隔部位小脑不同时期GFAP的表达变化。方法健康雄性Wistar大鼠60只,体质量250-300g,随机分为假手术1d组(n=6)、3d组(n=6)、5d组(n=6)、7d组(n=6)、10d组(n=6)。大脑中动脉闭塞后1d组(n=6)、3d组(n=6)、5d组(n=6)、7d(n=6)、10d组(n=6)。参照Zea Longa等制备大鼠大脑中动脉闭塞模型,Zea Longa的5级4分法评分,将评分在1-3分的动物纳入下一步实验。每组取4只大鼠用于HE染色及免疫组化,每组2只用于透射电子显微镜观察。HE染色观察小脑组织形态变化,电镜观察小脑超微结构变化,免疫组化法检测小脑GFAP的表达,然后进行统计学分析,(P<0.05)有显著性差异。结果1、HE染色结果示：MCAO后1d、3d、5d、7d、10d组与假手术组比较神经细胞的数量、形态分布正常,未见明显改变。2、透射电子显微镜观察结果示：MCAO后左侧小脑皮质1d组与假手术组未见凋亡细胞。MCAO后3d组可见早期凋亡细胞,5d组可见晚期凋亡细胞,7d组可见中期凋亡细胞,10d组可见早期凋亡细胞。3、GFAP免疫组化结果示：GFAP的阳性表达定位于AST胞浆,呈黄棕色,MCAO后1d、3d组可见阳性表达,但其胞体较小、突起少、阳性表达数量较少,与假手术组比较无显著性差异(P>0.05)。MCAO后5d、7d、10d组可见到阳性细胞表达增多、细胞体积增大、突起增多,与假手术组比较有显著差异(P<0.05)。结论大鼠大脑中动脉闭塞后远隔部位小脑髓质GFAP呈动态变化。