高压静电场对青霉菌、大肠杆菌和啤酒酵母杀菌效果和作用机理的试验研究

来源 :沈阳农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ananqiqi
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高压静电场作为一种微能源,在农产品贮藏保鲜、动植物培育、食品工程和水处理等领域已经有了一些研究和应用。微生物体内大多含有一定的电解质成分,适宜的高压静电场处理必然会对其生命活动产生影响,从而起到一定的杀菌效果。同时高压静电场杀菌与热杀菌相比,能够更好地保持食品的营养品质。目前这方面的研究极少,已有的少量试验也都停留在对微生物致死效果的层面,不够深入。选择高压静电场杀菌课题,符合食品低温高效杀菌的发展趋势,具有很高的学术价值和良好的应用前景。 本论文自行设计制作了高压静电场装置,选择青霉菌、大肠杆菌、啤酒酵母为处理对象,对其进行了高压静电场处理,观察了杀菌效果,通过检测菌体外形结构、菌液成分、菌体内酶的活性及DNA组织等的变化,初步探讨了致死机理。此外还针对牛奶、桔汁、桔子等进行了高压静电场杀菌的应用试验,探讨了杀菌效果和样品理化指标、感官指标等的变化。 本论文的主要结论如下: 1、高压静电场杀菌设备,总体应由高压电源、电路(包括升压电路、桥整流滤波电路、调压检测电路、保护电路等)、处理室、测量和控制装置等部分组成,以满足杀菌的需要。 2、高压静电场处理对青霉菌孢子的萌发具有促进和抑制的双重作用。电场强度小于400kV/m、处理时间小于20min时,萌发率明显高于对照。超过该值,孢子萌发率随着电场强度、处理时间增大而降低。电场强度大于620kV/m、处理时间超过1h,可完全抑制孢子的萌发。预萌发时间为4h以内时,随着预萌发时间增加,电场处理后萌发率明显减小,超过4h,电场对已萌发孢子的抑制则有所减弱。 影响孢子萌发率的因素主次顺序为:电场强度>处理时间>处理温度>预萌发时间。各因素对青霉菌孢子萌发率的影响程度都在显著水平之上。 青霉菌的芽管长度、产孢量和菌斑直径等指标,均随着电场强度和处理时间的延长而变小,变化趋势与萌发率相似。 3、高压静电场处理对大肠杆菌有良好的杀菌作用,大肠杆菌的致死率随电场强度的增大而迅速提高,当电场强度达到667kV/m时,大肠杆菌的致死率达98.7%。大肠杆菌致死率随处理时间延长和处理温度升高而上升。随着菌液量增多,大肠杆菌致死率稍有增加。 影响大肠杆菌致死率的因素主次顺序为:电场强度>处理时间>处理温度>处理量。最优水平组合为:电场强度为667kV/m,处理时间为60min,处理温度为40℃,处理量为8mL。该条件下大肠杆菌致死率为99.2%。 4、高压静电场处理对啤酒酵母具有良好的杀菌效果。啤酒酵母的致死率先随着电场强度增大而上升,当电场强度大于100kV/m后开始下降。100kV/m条件下的致死率先随着处理时间增加致死率不断上升,处理3min时最高,可达到99.1%,此后开始下降。啤酒酵母致死率随处理室温度升高而上升,但升幅不大,40℃和30℃相比仅升高2.3%。随着菌液量增大,啤酒酵母的致死率缓慢上升,8mL与6mL相比增加了1.2%。 影响啤酒酵母致死率的因素主次顺序为:电场强度>处理时间>处理温度>处理量。最优水平组合为A<,2>B<,2>C<,3>D<,3>即:电场强度100kV/m,处理时间3min,处理室温度40℃,处理量为8mL,其致死率为99.8%。 5、高压静电场处理后,青霉菌的孢子表面出现皱缩和孔洞,青霉菌中蛋白酶的活力和单孢子悬液的电导率没有明显变化。所以,高压静电场处理使青霉菌孢子的结构和形态受到破坏,是青霉菌孢子致死的主要原因。 6、高压静电场处理后,大肠杆菌菌体发生凹陷,表面凸凹不平。0~333kV/m电场强度下可提高大肠杆菌中蛋白酶活力,最多提高29.9%,超过333kV/m,酶活逐渐降低,降幅可达13.2%,去除菌体的上清液中蛋白质和核酸的含量与对照相比有显著增加,菌液的电导率有所升高,pH值有所下降,表明细胞结构被破坏使细胞质外流、DNA被破坏、酶活力改变等,是大肠杆菌致死的主要原因。 7、高压静电场处理后,啤酒酵母的中部出现凹陷,表面出现褶皱,啤酒酵母中蛋白酶活性没有明显变化,去除菌体的上清液中蛋白质和核酸含量与对照相比显著增加,菌液的电导率、pH值有所升高。因此,形态结构改变、细胞膜被破坏、细胞质外流是啤酒酵母致死的主要原因。 8、牛奶中大肠杆菌的致死率,随着高压静电场电场强度和处理时间的增加而上升。影响致死率的因素主次顺序为:电场强度>处理时间>处理温度>处理量,最佳参数组合为:电场强度500kV/m,处理时间45min,处理温度40℃,菌液量12mL。该条件下致死率为96.6%。处理前后牛奶的蛋白质、脂肪、非脂干物质含量等理化指标以及滋味、口感、气味、色泽等感官品质无明显变化,均在正常范围。 9、经高压静电场处理的孢子在桔子果实上的致病率较低,感病果实病斑的扩展也明显较慢。表明高压静电场处理能够抑制桔子果实发病,减缓病斑的扩展。 10、高压静电场处理对桔汁能起到较好的灭菌效果,随着高压静电场的处理剂量(场强×时间)增加,致死率明显增高,580kV/m、60min时为86.46%。随着电场强度的增加,Vc的损失越来越大,580kV/m损失达38.90%。桔汁的电导率随场强的增加而升高,580kV/m比对照提高12.60%。桔汁中可溶性圆形物、pH值等指标几乎没有影响。 总之,本论文的研究结果表明,高压静电场杀菌技术有较高的理论和应用价值,今后应进一步研究开发。
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