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背景:我们前期研究发现,三叉神经脊束尾核(trigeminal nucleus caudalis,TNC)中酸敏感离子通道3(acid-sensing ion channel 3,ASIC3)参与了反复发作性偏头痛的病理过程。神经生长因子(nerve growth factor,NGF)可以诱导许多疼痛疾病的痛觉敏化,并且可以调控ASIC3的表达。然而,NGF在慢性偏头痛(chronic migraine,CM)中的作用尚不清楚。所以我们探究了CM大鼠TNC部位NGF的表达,NGF对ASIC3的调控作用,及相关的信号通路在炎性汤(inflammatory soup,IS)诱导的皮肤痛觉过敏中的作用。方法:1.通过硬脑膜反复滴注7日IS建立CM大鼠模型,模拟CM的发作。von Frey测定大鼠眶周及足底的痛阈值,以此评价模型的建立。2.利用PCR,Western blot检测TNC部位NGF m RNA水平及蛋白水平,免疫荧光检测NGF在TNC神经元中的定位情况。3.CM大鼠侧脑室注射NGF中和抗体(anti-NGF neutralizing antibody,anti-NGF),von Frey检测大鼠眶周及足底痛阈值的变化,Western blot检测TNC部位蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)、ASIC3、降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)的蛋白表达,免疫荧光检测TNC部位CGRP的平均荧光强度及c-Fos的免疫阳性细胞数。4.CM组大鼠侧脑室注射PKC的抑制剂白屈菜红碱(chelerythrine chloride,CHE),von Frey检测大鼠眶周及足底痛阈值的变化,Western blot检测TNC部位ASIC3、CGRP的蛋白表达,免疫荧光检测TNC部位CGRP的平均荧光强度及c-Fos的免疫阳性细胞数。结果:1.与Sham组相比,CM组大鼠的眶周及足底痛阈值明显下降,这表明IS诱导了CM组大鼠的皮肤痛觉过敏。2.PCR,Western blot结果显示,CM组大鼠TNC部位NGF m RNA及蛋白水平明显高于Sham组。免疫荧光显示NGF与TNC部位神经元有共表达,并且NGF主要在神经元的胞质中表达。3.侧脑室注射anti-NGF明显提高了CM大鼠眶周和足底的痛阈值。Western blot结果显示,与Sham组大鼠相比,CM大鼠TNC部位PKC、ASIC3、CGRP的蛋白水平明显增高,但侧脑室注射anti-NGF明显降低了CM大鼠TNC部位PKC、ASIC3、CGRP的蛋白水平,也明显降低了CM大鼠TNC部位CGRP的平均荧光强度和c-Fos阳性细胞数。4.侧脑室注射PKC的抑制剂CHE缓解了IS诱导的皮肤痛觉过敏,并且明显下调了CM大鼠TNC部位ASIC3、CGRP的蛋白水平及CGRP的平均荧光强度、c-Fos阳性细胞数。结论:以上的结果表明,在IS诱导的CM大鼠模型TNC部位,NGF可能通过PKC调控了ASIC3的表达,这一信号通路可能参与了IS诱导的皮肤痛觉过敏。