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卵巢癌是女性生殖系统常见的恶性肿瘤之一,其发病率仅次于宫颈癌与子宫内膜癌位居第三。随着CA125联合经阴道超声筛查技术的应用,阳性诊断率仍仅为50%。迄今,卵巢癌仍为威胁女性健康的最主要的癌症,晚期的卵巢癌患者5年存活率仅为20%~30%。Pathway Array技术是一种具有高度敏感性和特异性的技术。该种方法用于卵巢癌差异表达蛋白的筛查尚未见相关报道。本论文通过Pathway Array技术筛查与卵巢癌发病相关的差异表达蛋白。目的:探索卵巢癌发生发展的信号转导机制,寻找用于卵巢癌早期诊断的生物学标记物及其分子治疗靶点。方法与结果:(1)体外实验:体外培养卵巢癌细胞和正常卵巢细胞,提取细胞总蛋白,用Pathway Array技术进行蛋白表达,用QUANTITY ONE分析软件进行差异蛋白表达谱分析,以卵巢癌细胞系SKOV3细胞为例与正常卵巢细胞系相比,6个蛋白表达水平有明显的升高:p-HER2/ErbB2、p-PDK1(Ser241)、p-Akt(Ser473)、TTF-1、ERK1/2和p-Stat3(Ser727)蛋白,4个蛋白表达水平有明显的降低:p-RB(Ser780)、p-c-Jun(Ser73)、Cdc25B和p-p53(Ser392)蛋白。(2)卵巢癌组织中差异表达蛋白的研究:在卵巢癌组织的高水平表达蛋白共12个,即p-Stat3 (Ser727)、p-PDK1 (Ser241)、p-Akt (Ser473)、p-cdc2 (Tyr15)、PCNA、Cdc2 p34、XIAP、E-cadherin、Cdk2、Mesothelin、p-p38 (pThr180/pTyr1 82)和P53蛋白;卵巢癌组织的低表达蛋白共9个,即ERK1/2、Cdc25C、Wee-1、cdc42、Bax、N-cadherin、α-tubulin、Vimentin和PTEN蛋白。(3)SKOV3细胞与卵巢癌组织的高水平表达蛋白有3个呈一致性高表达,即p-PDK1、p-Akt、p-Stat3;SKOV3细胞与卵巢癌组织的蛋白表达的差异性,显示在体肿瘤发生发展的复杂性,譬如,在SKOV3细胞p-p53的表达水平明显降低,而在卵巢癌组织中p-p53的表达水平则极显著地增高,是机体上调了野生型P53的表达,还是P53发生基因突变了需要进一步研究。对SKOV3细胞与卵巢癌组织中一致的高水平表达蛋白进行了免疫组织化学和Western Blot的验证,与Pathway array技术所获得的结果显示明显的一致性。(4)应用IPA系统分析21个差异表达蛋白相关的经典的信号通路和差异表达蛋白在信号传导中涉及的功能,得到与卵巢癌发生发展相关的信号通路网络。结论:初步探讨卵巢癌发生发展的信号传导机制,为寻找新的有效提高卵巢癌早期诊断率的肿瘤标志物和基因治疗的靶点,提供了有益的线索和理论基础。