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熊胆粉为脊索动物门哺乳纲熊科动物黑熊(Selenaretos thibetanus Cuvier)经胆囊手术引流胆汁而得的干燥品。主要含有的化学成分为胆汁酸、蛋白质、氨基酸、胆色素、微量元素等，其中胆汁酸类与熊胆粉清热解毒、保肝利胆、去翳明目等功效密切相关。此外，非胆汁酸类成分在熊胆粉的药理作用中也有不可忽略的地位。为解决熊胆粉受国内外动物保护组织抵制及药源稀少等危机，上海凯宝药业股份有限公司和重庆大学提出双酶连用循环转化技术将雉科动物家鸡(Callusgallusdomesticus Brisson)的鸡胆切制精制后体外培育转化，使转化产物符合熊胆粉的国家部颁标准，替代引流熊胆粉。 本课题利用新型电雾式检测器(CAD检测器)建立分析方法，制定生物转化熊胆粉与引流熊胆粉质量评价体系，建立质量标准。利用已有分析方法对不同来源20批引流熊胆粉中胆汁酸、胆红素、蛋白质、氨基酸、微量元素成分进行系统分析评价后，将上海凯宝药业股份有限公司提供的生物转化熊胆粉与其系统比较，判定是否能替代引流熊胆粉。该项目的研究成果对替代天然熊胆粉，保护和可持续利用珍惜濒危贵重药用动物资源，为含熊胆成分制剂生产提供质量稳定可控的原料有非常重要的经济价值与社会意义。 1.本实验采用新型的电雾式检测器(CAD检测器)建立了HPLC-CAD指纹图谱法与含量测定法，优化了反相薄层色谱和高效液相色谱方法，建立了生物转化熊胆粉与引流熊胆粉质量标准，拟写了质量标准草案。 HPLC-CAD指纹图谱可对生物转化熊胆粉中TUDCA、TCDCA、T-7-KLCA、UDCA、CDCA进行指纹图谱鉴别，对引流熊胆粉中TUDCA、TCDCA、TCA、UDCA、CDCA进行指纹图谱鉴别，能有效区别生物转化熊胆粉与其他胆粉。利用HPLC-CAD含量测定法对28批生物转化熊胆粉中牛磺熊去氧胆酸(26.17～36.13％)与牛磺鹅去氧胆酸(9.60～13.78％)进行测定，同时对转化中间体牛磺7-酮石胆酸(8.55～12.74％)进行限量;对20批引流熊胆粉中牛磺熊去氧胆酸(23.25～27.44％)和牛磺鹅去氧胆酸(16.08～25.00％)进行测定。该方法检测限与定量限均能做到ng级别，有良好的精密度与稳定性，线性方程相关系数均大于0.999，可快速的检测熊胆粉中胆汁酸含量，经测定不同批次熊胆粉均符合1996版熊胆粉《部颁标准》要求。 2.不同来源引流熊胆粉相似度较高(相似度系数为0.922～0.977)，均符合卫生部的质量标准，然而各样本在胆汁酸、胆红素、蛋白质、氨基酸、微量元素中又存在着差异之处，但差异较小。 将生物转化熊胆粉与引流熊胆粉比较，发现两者存在着相似(相似度系数为0.713～0.943)，但在TCDCA、T-7-KLCA、Cu、Ca、K、P方面又存在统计学差异和重要的分类意义。生物转化熊胆粉中牛磺熊去氧胆酸与牛磺鹅去氧胆酸约占熊胆粉质量的35％～40％，含量较引流熊胆粉(43～53％)少，其中TCDCA比引流熊胆粉少10％左右。由于生物转化熊胆粉是采用酶催化法将牛磺鹅去氧胆酸转化为牛磺熊去氧胆酸而制得，故含有一定量的转化中间体牛磺7-酮石胆酸(9～13％)，而在引流熊胆粉中不含T-7-KLCA。