越南槐种子的化学成分及其生物活性研究

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目的:本论文旨在对黔产豆科植物越南槐(Sophora tonkinensis Gagnep.)种子的化学成分及其相关生物活性进行系统的研究,寻找结构新颖和活性优良的单体化合物,为越南槐资源的开发及利用提供科学研究基础。方法:将干燥的越南槐(S.tonkinensis)种子粉碎,经甲醇加热回流提取。采用各种色谱技术方法,如:正相硅胶、聚苯乙烯基反相树脂(MCI)、反相C18硅胶(ODS)、凝胶柱色谱(Sephadex LH-20)、半制备高效液相色谱法(HPLC)等对粗提物进行分离纯化,再通过质谱、高分辨、红外、紫外、1D-NMR以及2D-NMR等波谱数据,结合其理化性质,对分离得到的化合物进行结构鉴定,最后通过单晶X-ray衍射以及ECD计算确定其绝对构型。此外,对分离得到的27个喹诺里西啶类生物碱,采用半叶枯斑法测定了其对烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)初侵染和增殖的抑制作用;进一步采用q RT-PCR生物分析检测技术,考察活性化合物4和26对TMV CP基因和TMV Rd Rp基因的表达影响;采用喷雾法测定15个喹诺里西啶类生物碱对蚕豆蚜(Aphis fabae)和棉红蜘蛛(Tetranychus urticae)的毒杀作用;选取17个化合物,采用DPPH法测定其抗氧化活性。结果:从越南槐(S.tonkinensis)干燥种子中分离鉴定69个化合物:苦参碱型生物碱23个;金雀花碱型生物碱4个;黄酮及二氢黄酮类13个;紫檀素类10个;萜类3个;苯丙素类8个;其他类型化合物8个。其中化合物1为具有5/6/6/6新颖四环骨架的苦参碱型生物碱;化合物2-11和28-29为新化合物;化合物41、51、54-59、62-67和69为首次从苦参属植物中分离得到。化合物2、4、6、26、29和30都表现出显著的抗TMV活性;作用机制初步研究表明:化合物4和26均可下调TMV CP基因的表达和积累,同时增强寄主植物对TMV的抵抗能力;化合物7、17、26对A.fabae有着较好的毒杀活性,其LC50值分别为38.29 mg/L、18.63 mg/L以及23.74 mg/L,化合物13和26对T.urticae表现出中等毒杀活性;化合物67表现出较好的抗氧化活性,其IC50值为0.177μg/m L。结论:本论文对越南槐种子化学成分以及生物活性进行探究,进一步丰富了越南槐不同药用部位的化学成分,为该植物在后续的研究及开发利用奠定了研究基础。
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