【摘 要】
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鸭疫里默氏杆菌病又称鸭传染性浆膜炎,是由鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)引起的急性或慢性、败血性传染病。该病可导致雏鸭产生广泛性浆膜胸膜炎,以及各组织器官不同程度的损伤。鸭疫里默氏杆菌病作为鸭的主要细菌病之一,该病带来的高死亡率、低饲料转化率给水禽养殖场造成了巨大的经济损失,严重制约了养鸭业的发展。本研究以34株安徽地区鸭疫里默氏杆菌为对象,分析其对各类抗生
【基金项目】
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江苏省农业科技自主创新资金项目(CX(18)1004); 泰州市科技支撑计划(农业)项目(TN201801); 江苏现代农业产业技术体系集成创新中心(JATS[2020]345); 江苏省高等学校自然科学研究重大项目(20KJA230004);
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鸭疫里默氏杆菌病又称鸭传染性浆膜炎,是由鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)引起的急性或慢性、败血性传染病。该病可导致雏鸭产生广泛性浆膜胸膜炎,以及各组织器官不同程度的损伤。鸭疫里默氏杆菌病作为鸭的主要细菌病之一,该病带来的高死亡率、低饲料转化率给水禽养殖场造成了巨大的经济损失,严重制约了养鸭业的发展。本研究以34株安徽地区鸭疫里默氏杆菌为对象,分析其对各类抗生素的耐药情况,并对该地区的鸭疫里默氏杆菌致病性进行初步探讨,以期为鸭疫里默氏杆菌临床防控与致病机制的深入研究提供依据。1.34株鸭疫里默氏杆菌安徽分离株的耐药性特征分析在对安徽地区34株鸭疫里默氏杆菌分离株药敏试验的基础上,进行氨基糖苷类、喹诺酮类和大环内酯类耐药基因以及Ⅰ类整合子鉴定。药敏试验结果表明,34株鸭疫里默氏杆菌分离株对头孢拉定、头孢曲松、氟苯尼考、大观霉素、磺胺异恶唑等抗生素较敏感,对卡那霉素、庆大霉素、丁胺卡那、链霉素、阿奇霉素等抗生素均有较强的耐药性。其中97%的菌株存在多重耐药现象,最高可耐19种抗生素。27种耐药基因鉴定结果显示,氨基糖苷类aac(6’)Ⅰb、aac(6’)Ⅱ、rmtC和aph(3’)Ⅱa基因检出率分别为 94.1%(32/34)、82.4%(28/34)、73.5%(25/34)和 70.6%(24/34),喹诺酮类qnrA、qnrB和qnrS基因检出率分别为 2.94%(1/34)、14.71%(5/34)和 14.71%(5/34),其余基因均未检测到;同时34株分离株均携带Ⅰ类整合子,大小为1kb,其基因盒种类为aadA1(链霉素耐药基因)。2.34株鸭疫里默氏杆菌安徽分离株的毒力相关基因鉴定及其致病力研究将34株鸭疫里默氏杆菌分离株进行血清学试验、毒力相关基因鉴定以及动物回归试验。结果发现血清1型检出率为29.4%(10/34),血清2型为61.8%(21/34),其余3株未定型。毒力相关基因tctR、luxr1、lipidA和luxC基因的检出率均为100%(34/34),IS1、luxr2和luxE基因的检出率均为97.1%(33/34),TR基因的检出率为88.2%(30/34),AMT和cwaH基因的检出率均为85.3%(29/34);34株RA分离株共有5种毒力基因谱。雏鸭致病性试验结果表明有82.4%(28/34)的RA分离株经攻毒后均引起雏鸭不同程度死亡,其中引起雏鸭100%致死的菌株比例最高,占32.4%(11/34)。3.鹅源鸭疫里默氏杆菌感染雏鸭载菌量变化与组织病理学研究对安徽地区一株鹅源RA分离株AH-26进行血清型、耐药性鉴定,然后测定其对鹅、鸭的半数致死量,再将该分离株感染雏鸭,通过血液、脏器载菌量测定、组织病理学试验等来研究鹅源RA感染雏鸭后的发病规律。经鉴定鹅源RA分离株AH-26为血清2型菌株,菌株对头孢拉定、氯霉素、氟苯尼考、磺胺异恶唑等抗生素高度敏感,对甲氧苄氨嘧啶、复方新诺明、多粘菌B、红霉素、克林霉素、丁胺卡那等13种抗生素表现为耐药。结果显示,分离株AH-26对雏鹅和雏鸭的LD50分别为1×103.7CFU和1 ×104.5CFU,即鹅源RA分离株AH-26对鹅的致病力更强。发病雏鸭呈现典型纤维素性心包炎、肝周炎和纤维素性炎症反应,其中肝脏和心脏发生病理变化最早,而肺脏、脾脏较晚。载菌量检测发现,攻毒后第1天血液和各脏器中已有菌株定殖,提示RA在1天内就突破了雏鸭的整个机体屏障;表现为攻毒后前3天载菌量增值较为缓慢,第4天急剧上升。组织病理切片显示,攻毒组雏鸭肝细胞发生水泡变性和脂肪变性,肺局部出现间质淋巴细胞及少量巨噬细胞浸润,肾小管上皮细胞发生轻度脂肪变性;心脏、脾脏攻毒后4天内病理切片均未见明显病理变化。综上所述,本研究检测的34株鸭疫里默氏杆菌安徽分离株大多存在多重耐药性;分别检出4种氨基糖苷类和3种喹诺酮类耐药基因,且全部携带Ⅰ类整合子基因盒aadA1(链霉素耐药基因);优势血清型为血清1型和2型;鉴定出4个高度保守毒力相关基因tctR、luxr1、lipidA和luxC;鹅源RA分离株AH-26对雏鹅的致病力高于雏鸭;攻毒后第1天,就发现病菌在血液和各脏器中定殖,引起肝脏、肺脏和肾脏发生病变。
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