抗生素是用于治疗或抑制微生物感染的药物,抗生素疗法是20世纪最重要的医学成就之一,拯救了数以百万计的生命。但由于抗生素大规模长时间的使用,抗生素耐药在世界范围的传播已经成为一个巨大的公共卫生挑战。毒力代表病原体的致病能力,发挥细菌毒力的物质被称为毒力因子。与传统的抗生素相比,抗毒力疗法通过抑制细菌毒力来阻止细菌伤害宿主,具有对病原菌生存压力小,产生耐药性风险低等优势,已经成为抗菌药物的重要设计策略。Ⅲ型分泌系统（T3SS）是一种复杂的毒力蛋白分泌装置,常见于包括沙门菌在内的大多数革兰阴性病原菌。T3SS通过将效应蛋白直接注射到宿主细胞中发挥作用,是许多病原菌致病的关键因素,这也使得T3SS成为抗毒力研究领域备受关注的一个靶标。在前期研究中,本课题组发现真菌聚酮cytosporoneB、镰刀菌酸（fusaric acid）、甘草黄酮醇（licoflavonol）和杨梅醇（myricanol）是沙门菌T3SS的强效抑制剂,并根据其结构特征进行合理化药物设计,合成了二苯乙烯类、肉桂酰胺类和二苯硫醚类共71个化合物。本论文通过SDS-PAGE分析对这71个化合物进行了T3SS抑制活性筛选和构效关系研究。结果表明二苯乙烯类化合物SS-A6、SS-A13和SS-A14,肉桂酰胺类化合物SY-20及二苯硫醚类化合物SL-8和SL-19具有较好的T3SS抑制活性。通过western blot、生长曲线测定、庆大霉素保护实验、细胞毒性测试、胞内外蛋白水平检测、实时定量PCR等实验方法,本文对上述6个化合物进行了T3SS抑制活性评价和初步的作用机制探讨。结果表明,6个化合物对鼠伤寒沙门菌SPI-1效应蛋白的分泌均表现出剂量依赖性抑制,且均不抑制细菌生长繁殖;同时6个化合物能显著抑制鼠伤寒沙门菌对人结肠腺癌Caco-2细胞的侵袭,并对Caco-2细胞均无明显毒性。初步作用机制研究表明,SS-A6可能抑制SipC蛋白的跨膜分泌过程,SY-20可能对HilD-HilC-RtsA三元转录调控环有抑制作用,SL-8和SL-19可能与SipC蛋白结合抑制其跨膜转运。最后,本论文还尝试构建和表达标签融合蛋白SipC-HA,为开展蛋白质-小分子互作研究奠定了实验基础。综上所述,本论文对二苯乙烯类、肉桂酰胺类和二苯硫醚类天然产物衍生物进行了活性筛选、评价与初步机制研究,发现了 6个结构新颖的T3SS抑制剂,为深入探讨其作用机制奠定基础,对开发新型T3SS抑制剂具有积极意义。