论文部分内容阅读
食管癌(Esophageal Carcinoma,EC)是世界上最常见的六大恶性肿瘤之一,具有显著的地域性分布差异。我国食管癌死亡率在世界上居首位,而河南省安阳地区是我国、也是世界上食管癌发病率最高的地区之一,其病理类型以食管鳞癌(ESCC)为主。同时,贲门腺癌(GCA)也是此地区最常见的恶性肿瘤之一,其显著流行病学特征是与食管癌地域性分布的高度一致性,提示二者可能存在相似的致癌危险因素和遗传基础。流行病学调查表明,该地区居民普遍存在多种营养物质的缺乏,特别是叶酸缺乏。作为机体最重要的营养物之一,叶酸的代谢决定机体S-腺苷蛋氨酸(SAM)及脱氧核苷酸的从头(de novo)合成,从而影响机体的正常生命活动。叶酸代谢关键酶亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)与胸腺嘧啶合成酶(TS)分别催化5,10-亚甲基四氢叶酸(5,10-methylene THF)向5-甲基四氢叶酸(5-methyl THF)的不可逆转变及使脱氧尿嘧啶(dUMP)不可逆的转化为脱氧胸腺嘧啶(dTMP)。近来报导MTHFR基因第677位核苷酸存在C和T碱基置换的多态位点,而TS基因启动子增强区存在28bp的串联重复序列多态位点,二者均影响基因产物表达或活性。作者的假设是,在安阳食管癌高发区人群普遍叶酸缺乏的情况下,此二基因多态所造成的酶活性降低或表达下降,将会通过干扰正常的叶酸代谢而影响机体患ESCC及GCA的危险性,并是造成该地区ESCC与GCA显著的一致性地域分布的遗传学基础之一。我们通过对该地区人群进行回顾性“病例-对照”研究,从而探讨此二种基因多态与食管及贲门癌变的关系,以验证我们的假设,并为高危人群的筛选和防治提供有意义的信息和手段。 材料和方法:实验包括275例ESCC患者及129例贲门腺癌GCA患者,所有病例均来自安阳地区,于2000年至2002年间在安阳肿瘤医院确诊,并且排除有其它恶性肿瘤病史者;315例与病例组年龄性别相匹配的正常对照随机选自该地区志愿参与内镜普查的人群,所有入选者均经详细问卷调查,以查明其疾病史并排河南安阳地区人群食管及责门癌变与亚甲基四氢叶酸还原酶、胸腺嗜吮合成酶基因多态改变关系研究除有肿瘤病史者。采用美国Gentra公司的试剂盒以盐析法从血凝块残留液中提取基因组DNA,采用PCR法及基于PCR基础上的限制性片段多态检测法 (PCR-RFLP)对各基因型进行检验和区分。采用回顾性“病例一对照”试验设计,所得的对照组数据用Fishe:Exact xZ检验验证其各基因型分布是否符合Hardy一weinberg平衡,危险度计算均采用非条件性逻辑斯谛回归模型(uneonditional logistie resression models)对年龄、性别进行校正后计算比数比 (odds Ratios,OR)及95%可信区间(Confidential Iniervals,Cl),以上计算均由s肠订A 7.0(conege station,Tx,usA)统计软件进行分析。以上检验显著性水准均采用a=o.05。结果:1.MTHFR677的突变型T等位基因频率在对照组、ESCC组和GCA组分别为 54%,62%and63%;TSER的突变型ZR等位基因频率在对照组、ESCC组和 CCA组分别为19%,21%and 21%。2.MTHFR677各基因型在对照组的分布频率分别为23.5%(MTHFR677CC)、 45.4%(MTI叫IF,R677CT)以及3 1.1%(MTHFR677TT);在ESCC组,这些基 因型的频率分别为18.6%(MTHFR677CC)、38.2%(MTHFR677CT)以及 43.3%(MTI正R677TT);在GCA组,这些基因型的频率分别为19.4% (MTHFR677CC)、34.9%(MTHFR677CT)以及45.7%(MTI丑;R677TT)。 对于TSE民其各基因型的分布频率在对照组分别为64.1%(TSER3侧3R或 TSER3R/4R)、34.0%(TSER3R/ZR)以及1.9%(TSERZR/ZR);在ESCC组, TSER各基因型的分布频率在对照组分别为61 .5%(TSER3侧3R)、34.5% (T SER3R/ZR)以及4.0%(TSERZFJZ助;在GCA组,TSER各基因型的分布频 率在对照组分别为62.8%(TsER3侧3R)、30.2%(T sER3侧ZR)以及 7.2%(TSERZ侧ZR)。各基因型在对照组的分布均符合群体遗传学 Hardy一Weinbe唱平衡(MTHFR677,p=0.124;TSE民P== 0.054)。3.与MT班R677CC及MTHFR677CT两基因型相比,纯合突变型 (MTHFR677TT)携带者患ESee的危险度升高1 .62倍(95%Cl,1.15一2.30), 而患GCA的危险度升高1.81倍(95%CI,1.17一2.81),皆具有显著性统计学意 义。 郑州大学医学院癌症研究室2003届硕士研究生毕业论文 4.与作为参考组的其它基因型相比,纯合突变型(TSERZ侧ZR)患ESCC的危 险度升高2.44倍(95%ex,0.59一6.73),患优A的危险度升高3.94倍(950,0 ex, 1.29一12.0),后者具有显著性统计学意义。 5.将MTHFR677CC或MT班R677TT型的携带者与TSER3R/3R(4R)或 TSERZ侧3R型的携带者结合作为参考组,考查各类MTHFR677与TSER基 因型组合(C。mbination)患癌的危险度。相对于参考组,仅有突变型 MT盯R677(MTHFR677TT)而无突变型TSER的基因型组合携带者患ESCC 的危险度升高1.60倍(95%CI,1.13一2.28),患6CA的危险度升高1.84倍(95% Cl,1.17一2.88),均具有统计学显著性意义;与参考组相比,仅有突变型TSER (TSERZ侧ZR)而无突变型MTHf,R677的基因型组合携带者患ESCC的危险