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谷蠹、赤拟谷盗和谷象鼻虫是危害世界粮食储存的主要昆虫,对粮食的安全储存造成了很大的威胁。以往以化学农药为主的防治措施,已经引起了害虫抗药性增加及污染等问题。害虫的嗅觉在其寄主定位中起着关键的作用,如果能够明确害虫在其寄主定位中的嗅觉感受机制,将可为利用嗅觉行为调控害虫提供理论依据。为此,本文在探究破碎种子对谷蠹、赤拟谷盗和谷象鼻虫等繁殖影响的基础上,对几种害虫的触角感器进行了研究,克隆了谷蠹嗅觉相关的化学感受蛋白(CSP)和信息素结合蛋白(PBP)基因,分析了PBPs基因的表达水平,以期为明确重要储粮害虫的嗅觉感受机制及研发其行为调控技术提供理论基础和技术支持。主要研究结果如下: 1.不同谷物及受损谷物对谷象、谷蠹和赤拟谷盗繁殖的影响 对受损谷物与谷象、谷蠹和赤拟谷盗等三种害虫发育、成虫体重、性比及繁殖的相关性进行了分析。结果表明,受损谷物饲养谷象、谷蠹和赤拟谷盗等几种害虫但F1代成虫的出现明显滞后;在受损小麦上饲养谷象获得的F1代成虫的总量,明显高于在玉米、大麦和大米上饲养的谷象,而谷蠹和赤拟谷盗F1代成虫数量在不同谷物之间无显著差异;几种谷物上饲养谷象等三种储量害虫F1代成虫中,雌成虫的数量均高于雄成虫;不同谷物饲养谷象等三种害虫F1代成虫的体重均不存在显著差异,但用小麦饲养的F1代谷象雌成虫的体重重于雄成虫,而玉米是谷蠹最适的食物。 2.谷象触角感受器的观察 利用透视电子显微镜对谷象触角感受器进行了研究。结果表明,谷象触角上锥形感受器的透视电子显微镜图有一明显特征,即表皮上有显著波纹状的小孔,而腔锥形感受器纵向组织的透视电子显微镜图,展示了平滑表面钉状组织、平尖组织和顶孔,这两类感器具有味觉功能;刺形感受器纵向组织的透视电子显微镜图表明,树突、表皮带有小孔的箭头状物可能具有检测湿度、热度和二氧化碳的功能。 3.赤拟谷盗触角感受器的观察 利用透视电子显微镜对赤拟谷盗触角感受器进行了研究。结果表明,毛形感受器有一个厚厚的表皮壁,表皮壁四周是普通的点状小孔;锥形感受器则有薄薄的表皮壁、连续的小孔和树突,表明它们具有感知化学刺激和嗅觉功能。 4.谷蠹 CSP2s、PBP1和 PBP2基因的克隆与分析 基于实验室已建的转录组数据,克隆了谷蠹 CSPs2、Rhydomica PBPs1和Rhydomica PBPs2等三个基因(基因库增加基因分别为KJ186798.1、KJ186830.1、KJ186831.1);Rhydomica CSPs2有4个半胱胺酸残基,而 Rhydomica PBPs1和Rhydomica PBPs2有6个半胱胺酸残基;对谷蠹PBPs1和PBPs2基因表达水平测定的结果表明,Rhydomnica PBP2的表达远高于Rhydomnica PBP1,PBP2基因在雄成虫羽化1天时的表达量最低,5天和10天的表达量达最大值。不同发育时间的变化转录水平表明,PBP1和 PBP2在寻找食物源、交配、产卵等方面都承担着特定功能。