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目的:采用人体肠道模型发酵系统,通过对功能性便秘(functional constipation,FC)的幼儿粪便进行发酵分析,研究乳果糖(lactulose,LAU)在结肠被肠道菌群降解率和代谢,探讨LAU治疗幼儿FC的作用机制与疗效的关系,为今后LAU治疗幼儿FC提供个体化及精准化方案。资料与方法:选取2020年5月至2020年12月期间于苏州大学附属儿童医院门诊21例符合罗马Ⅳ诊断标准的FC幼儿,设为观察组,平均年龄为2.87岁,均符合以下标准:(1)年龄11个月~4岁之间;(2)符合罗马Ⅳ标准中幼儿FC诊断标准;(3)足月儿(胎龄≥37周)及正常体重儿(出生体重≥2500g)。并对入选观察组病例进行随访,其中脱落5例,实际随访共16例,设为观察组治疗后,选取同期于苏州大学附属儿童医院儿童保健科例行体检的22例健康幼儿设定为对照组,平均年龄为1.51岁,均符合以下纳入标准:(1)年龄1岁至4岁之间;(2)足月儿(胎龄≥37周)及正常体重儿(出生体重≥2500g);(3)排除近1月有咳嗽、发热等上呼吸道感染史;(4)排除近1月有腹痛、腹泻、呕吐等消化道感染史;(5)排除近1月有尿痛、血尿等泌尿道感染史;(6)排除近1月有服用影响肠道菌群药物史(如益生菌、抗生素等)(7)排除有生长发育落后、肥胖症、糖尿病史。收集三组研究对象2小时内的新鲜粪便标本置于低聚糖培养基(如基础培养基(YCFA)、乳糖(LAT)、乳果糖(LAU)、低聚果糖(FOS)、低聚半乳糖(GOS)、菊粉(INU)、可溶性淀粉(STA)、水解酪蛋白(YCP)、水解乳蛋白(YLH)等)中,并于37℃恒温箱中发酵24小时,应用薄层色谱法计算发酵前后LAU及其他低聚糖在观察组、观察组治疗后与对照组中的降解率,采用气相色谱法(Gas chromatography,GC)检测各培养基中的SCFA总酸、乙酸、丙酸、丁酸、异丁酸、戊酸、异戊酸等含量,利用气体压力测量仪测定各培养基中产气量,最后应用SPSS 23对数据进行统计学分析。结果:1、观察组LAU的降解率明显高于观察组治疗后(P<0.01)和对照组(P<0.01);观察组治疗后LAU降解率明显高于对照组(P<0.05),其他低聚糖LAT、FOS、GOS、INU、STA降解率与LAU类似,具有统计学意义(P<0.05)。2、观察组粪便中丙酸含量明显高于对照组(P<0.05),异戊酸含量明显低于对照组(P<0.05),SCFA总酸、乙酸、丁酸含量与对照组无统计学差异(P>0.05),其中,观察组丙酸比例明显高于对照组(P<0.05)。3、观察组粪便中乙酸:丙酸:丁酸占SCFA总酸含量的百分比为77.37:18.75:4.58,观察组治疗后三者之比为83.13:13.36:2.43,对照组三者比值为83.57:11.45:3.62,观察组粪便中丙酸含量显著高于对照组(P<0.05)。4、粪便经体外发酵后总酸含量对比,观察组LAU中总酸含量显著高于对照组(P<0.05),在其他多糖培养基中,观察组YCFA、FOS、GOS、INU、STA、YLH培养基中总酸含量显著高于对照组(P<0.05),观察组治疗后FOS、YLH培养基中总酸含量明显高于对照组(P<0.05)。5、粪便经体外发酵后乙酸含量对比,观察组LAU中乙酸含量显著高于对照组(P<0.05);观察组治疗后LAU中乙酸含量显著高于对照组(P<0.05)。在其他多糖培养基中,观察组YCFA、LAT、FOS、GOS、INU、STA、YLH培养基中乙酸含量显著高于对照组(P<0.05),观察组治疗后LAT、INU、STA、YLH培养基中乙酸含量明显高于对照组(P<0.05)。6、粪便经体外发酵后丙酸含量对比,观察组LAU中丙酸含量显著高于对照组(P<0.05);观察组治疗后LAU中丙酸含量显著高于观察组治疗后(P<0.05)。在其他多糖培养基中,观察组YCFA、FOS、GOS、STA、YCP、YLH培养基中丙酸含量显著高于对照组(P<0.05),观察组治疗后FOS、GOS、YLH培养基中丙酸含量明显高于对照组(P<0.05),观察组FOS、GOS、STA培养基中丙酸含量明显高于观察组治疗后(P<0.05)。7、粪便经体外发酵后丁酸含量对比,观察组、观察组治疗后及对照组之间两两相比后,粪便发酵液中LAU差异无统计学意义。在其他多糖培养基中,观察组YLH培养基中丁酸含量显著高于对照组(P<0.05),观察组治疗后YCFA培养基中丁酸含量明显高于对照组(P<0.05)。8、粪便经体外发酵后异戊酸含量对比,观察组LAU中异戊酸含量显著高于对照组(P<0.05);观察组治疗后LAU中异戊酸含量显著高于对照组(P<0.05)。在其他多糖培养基中,观察组 YCFA、LAT、LAU、FOS、GOS、INU、STA、YCP、YLH培养基中异戊酸含量显著高于对照组(P<0.05);观察组治疗后YCFA、LAU、GOS、INU、STA培养基中异戊酸含量明显高于对照组(P<0.05),观察组YLH培养基中异戊酸含量明显高于观察组治疗后(P<0.05)。9、24小时产气量比较,观察组LAU中产气量显著高于对照组(P<0.05),观察组治疗后与对照组及观察组与观察组治疗后相比,差异无统计学意义。在其他多糖培养基中,观察组、观察组治疗后、对照组之间产气量比较,两两相比后,差异无统计学意义。结论:1、幼儿FC粪便代谢产物特征是:乙酸:丙酸:丁酸占SCFA总酸含量百分比值异常改变,是以丙酸含量增高为主要特征,提示幼儿FC的肠道菌群紊乱,产丙酸的能力增强。LAU治疗后,其百分比值接近于正常幼儿,表明LAU有诱导肠道菌群趋向正常的可能。2、幼儿FC的肠道菌群对LAU及其他低聚糖的降解率增高,经LAU治疗后其降解率明显降低,表明LAU是通过改变肠道菌群代谢起作用,提示测定LAU降解率的可作为治疗幼儿FC疗效判断以及剂量调整的一个临床指标。3、幼儿FC肠道菌群酵解LAU产生的SCFA总酸、乙酸、丙酸、异戊酸和产气能力增强,进一步印证了幼儿FC肠道菌群紊乱,并且使用LAU可以改善肠道菌群进而逆转异常的代谢产物。4、通过体外发酵模型测定SCFA水平并进一步计算LAU降解率来评估LAU治疗FC幼儿肠道菌群变化关系的一个操作简单、适用性好并且可靠的方法,为今后LAU个体化治疗幼儿FC提供基础。