柴油废气颗粒的吸入对大鼠速发型哮喘反应的影响

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目的:探讨空气污染物中柴油废气颗粒(diesel exhaust particle DEP)的吸入对大鼠速发型哮喘反应的影响。方法:选择Wistar雄性大鼠60只,随机分为六组,每组各10只,B组为哮喘模型组,利用新鲜配制卵清白蛋白(OVA)100mg+氢氧化铝100mg共1ml于第1,8,15天给予腹腔注射,第22天开始给予3%卵清白蛋白(OVA)+生理盐水溶液雾化吸入,每天一次,每次30min,连续7d。A组为正常对照组,以生理盐水代替卵清白蛋白分别进行腹腔注射和雾化吸入。C,D,E,F组于第一天开始用OVA攻击(方法与B组相同),之后在给予吸入DEP200μg/ml+生理盐水溶液分别各1,2,3,4周,所有攻击结束一周后再给予3%卵清白蛋白气道激发30min。测定每只大鼠气道阻力(RL)的变化,观察支气管肺泡灌洗液(BALF)中的炎症细胞的百分比和肺组织病理形态学的改变,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定血清中IgE的浓度和肺组织中的白介素-5(IL-5)和γ-干扰素(IFN-γ)水平的变化。结果:①A组大鼠未发生呼吸道高反应性,B、C、D、E、F组在吸入3%卵清白蛋白30min内的不同时间点(5min,10min,15min,20min,25min,30min)的气道阻力与A组比较差异均有统计学意义(F=160.646,F=148.901,F=146.644,F=162.204,F=160.935,F=156.186,P<0.01),B组与E、F组吸入3%卵清白蛋白30min内不同时间点(5min,10min,15min,20min,25min,30min)的气道阻力比较差异有统计学意义(P<0.01),吸入DEP组各组大鼠的气道阻力与与DEP吸入的时间有显著的相关性(r=0.948,P<0.01)。②B组BALF中嗜酸性粒细胞占细胞总数的百分比(EOS%)较A组明显增高,与A组比较差异有统计学意义(F=23.240,P<0.01),B组BALF中嗜酸性粒细胞占细胞总数的百分比与C、D、E、F组比较差异有统计学意义(F=23.240,P<0.01),从DEP吸入1周(C组)开始以中性粒细胞为主浸润的炎症细胞明显增多,B组大鼠BALF中的中性粒细胞数占细胞总数的百分比与E、F组间比较差异有统计学意义(F=36.329,P<0.01)。③B组大鼠的血清中IgE的浓度较A组的明显增加,与A组比较差异有统计学意义(F=2.490,P<0.01),B组大鼠的血清中IgE的浓度与C.D、E、F组间比较差异均无统计学意义(p>0.05)。④肺组织病理切片中可以看到A组上皮细胞完整,气道周围未见炎症细胞的浸润,以纤毛柱状上皮细胞为主,仅有少量的杯状细胞,基底膜未见纤维化。实验组随着DEP的1,2,3,4周的吸入,逐渐出现上皮细胞的坏死、中断、脱落,杯状细胞增生,气道周围的炎症细胞的浸润及基底膜的纤维化等改变。⑤B组大鼠肺组织中IL-5的浓度与C、E组间比较差异有统计学意义(F=4.263,P<0.01),各组大鼠肺组织中IFN-γ的浓度之间比较差异均无统计学意义(F=1.193,P>0.05)。结论:空气污染物中DEP的吸入可以加重大鼠速发型哮喘反应。
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