细菌耐药性是21世纪全球关注的热点,随着抗生素的广泛应用,超级细菌得以产生和蔓延,人类有可能迎来无药可用的“后抗生素时代”。天然产物是最佳的抗菌药物筛选数据库,从我国传统中药中发现抗菌活性物质,是目前新型抗生素发现的重要途径之一。论文通过对14味中药对临床致病菌的体外抗菌活性研究,筛选出具有较好抗菌活性的药物—地榆,继而对地榆进行了体内抗菌作用研究,然后基于中药系统药理学和Caco-2单层细胞模型对3种具有体外抗菌活性的地榆单体成分进行肠道模拟吸收验证,以及初步抑菌机制研究,探讨地榆可能的抗菌活性物质及作用机理,为中药的抗菌研究提供新的思路。论文分五部分进行研究。第一部分:筛选具有抗临床分离致病菌活性的中药。采用美国临床实验室标准化委员会（CLSI）推荐的琼脂平皿二倍稀释法,测定文献报道中具有抗菌活性的14味中药对7种临床分离致病菌的体外最低抑菌浓度（MIC）。结果显示地榆对临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）的MIC₅₀值均为2.1 mg生药/m L,具有较好的体外抗菌活性,同时体现出MRSA对其的不耐药性,故将地榆作为研究的受试药物,MRSA作为研究的受试菌株。第二部分:考察地榆水提液的体内抗菌作用。采用MRSA引起的小鼠急性腹腔感染模型和大鼠皮肤感染模型,评价地榆水提液的体内抗菌药效作用。结果显示小鼠口服地榆5、10g生药/kg可延长MRSA所致的急性腹腔感染模型动物的存活时间（P<0.05,P<0.01）,大鼠外敷地榆0.31、1.25 g生药/kg可抑制MRSA所致皮肤感染模型创口细菌的生长（P<0.01）。第三部分:筛选地榆成分中具有抗菌活性的物质。通过TCMSP中药系统药理学数据库与分析平台检索和相关文献调研,以及体外MIC测定。筛选出地榆皂苷Ⅱ、山奈酚和熊果酸三种化合物对临床致病菌MRSA具有一定的抑菌活性。其中地榆皂苷Ⅱ、山奈酚对MRSA的MIC₅₀值为128μg/m L,熊果酸对MRSA的MIC₅₀值为32μg/m L。第四部分:考察地榆皂苷Ⅱ、山奈酚和熊果酸的细胞膜透过率。采用Caco-2单层细胞模型,HPLC测定浓度。结果显示山奈酚透过率为45.4%,地榆皂苷Ⅱ透过率为67.3%,熊果酸透过率为13.4%。第五部分:初步研究地榆水提液和地榆皂苷Ⅱ、山奈酚、熊果酸对MRSA的抑菌机理。比色法检测样品对MRSA培养液中β-D-半乳糖苷酶活性和DNA、RNA含量的影响,以评价其对细菌膜的影响,并通过荧光定量聚合酶链式反应（PCR）检测MRSA细菌壁膜相关基因Fmh B和Lyt M的表达水平,初步探讨该作用的机理。结果显示与菌对照组相比,地榆和熊果酸1MIC及2MIC处理组的胞外β-D-半乳糖苷酶活性和核酸大分子含量均显著升高（P<0.01,P<0.05）,地榆及熊果酸1/2MIC和1/4MIC处理组的菌株中Lyt M基因的表达显著上调（P<0.01）。综上所述,本课题通过14味中药对7种临床致病菌MIC的测定,筛选出对MRSA具有较好体外抗菌作用的中药——地榆,然后对地榆进行了体内抗菌作用研究,发现地榆对临床MRSA具有较好的体内外抗菌活性。继而对地榆的成分进行了筛选和验证,发现地榆皂苷Ⅱ、山奈酚和熊果酸对MRSA具有体外抑菌作用,并且可以透过Caco-2单层细胞模型,认为这三种化合物可以透过肠道,有可能是地榆体内抗菌作用的部分物质基础。其中熊果酸与地榆水提液对细胞壁膜的作用机制相同,增加细胞膜的通透性和加速细菌溶解可能是地榆发挥抗菌的一个作用途径。地榆皂苷Ⅱ、山奈酚及地榆其他的抗菌机制有待进一步研究。