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类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)是一种涉及T、B淋巴细胞以及多种致病因素的系统性自身免疫病。B淋巴细胞刺激因子(B lymphocyte stimulator, BLyS)对B淋巴细胞的成熟和存活起重要作用。大量研究证实,BLyS的过表达与RA等自身免疫病的发病机理和疾病进程有密切联系,RA病人的血清和关节滑液中都存在高表达的BLyS,且关节滑液中BLyS的水平高于血清。跨膜激活、钙调和亲环素配体相互作用因子(transmembrane activator and calcium modulator cyclophilin ligand interactor, TACI)是BLyS的受体之一,被发现表达于B淋巴细胞和活化的T淋巴细胞。BLyS受体TACI融合蛋白(TACI-immunoglobulin, TACI-Ig)是由TACI受体的胞外部分和人免疫球蛋白IgG的Fc段连接而成,它能竞争性地与BLyS结合,阻断BLyS所介导的B淋巴细胞激活。本课题在建立DBA/1小鼠胶原性关节炎(collagen induced arthritis, CIA)模型的基础上,研究了TACI-Ig对小鼠CIA的治疗作用,并对其部分机制进行了探讨。目的:初步探索TACI-Ig对小鼠CIA的治疗作用及有效剂量,并进一步研究TACI-Ig治疗小鼠CIA的作用特点及部分机制。方法:在建立CⅡ诱导的DBA/1小鼠CIA模型基础上,对CIA小鼠进行关节炎指数评分;足爪X线检查;关节和脾脏的病理检查及病理学评分;胸腺指数和脾脏指数测定;3H-TdR掺入法检测B淋巴细胞和T淋巴细胞增殖反应;ELISA法检测血清中细胞因子BLyS和抗体IgA、IgM的水平;免疫组化法检测小鼠脾脏中CD20的表达;流式细胞术测定小鼠脾脏CD19~+、CD19~+IgD~+、CD19~+CD27~+、CD19~+IgM~+、CD19~+CD21~+和CD19~+CD23~+细胞的百分含量;流式细胞术测定小鼠胸腺CD3~+CD4~+、CD4~+CD154~+、CD4~+CD25~+、CD4~+CD69~+和CD4~+CD62L~+细胞的百分含量;使用Transwell细胞隔离培养体系共培养CIA小鼠B淋巴细胞和T淋巴细胞后,MTT法检测B淋巴细胞和T淋巴细胞增殖反应。结果:1. TACI-Ig治疗小鼠CIA的有效剂量探索TACI-Ig (3.333、10和30 mg/kg,腹腔注射,每周三次,给药六周)可不同程度地降低CIA小鼠关节炎指数,改善CIA小鼠足爪放射学改变以及关节和脾脏的病理变化,降低CIA小鼠增高的胸腺指数和脾脏指数,抑制CIA小鼠增强的B和T淋巴细胞增殖反应,以及降低CIA小鼠血清中高水平的BLyS;TACI-Ig (10 mg/kg)和TACI-Ig (30 mg/kg)两组之间无显著性差异。TACI-Ig (1.105 mg/kg)只能降低CIA小鼠血清中的BLyS水平,而TACI-Ig (0.35 mg/kg)对上述指标都没有明显影响。这表明TACI-Ig对小鼠CIA有治疗作用,其最佳剂量范围主要在3.333-10 mg/kg,为进一步研究TACI-Ig对小鼠CIA的治疗作用特点和作用机制提供剂量范围。2. TACI-Ig对小鼠CIA的治疗作用特点TACI-Ig (3和9 mg/kg,皮下注射,每周三次,给药六周)可明显降低CIA小鼠关节炎指数;降低CIA小鼠关节滑膜组织增生、细胞浸润、血管翳形成、炎症和骨质侵蚀评分;降低CIA小鼠脾脏动脉周围淋巴鞘细胞密度、淋巴滤泡增生、边缘区细胞密度和红髓充血评分以及生发中心数量。TACI-Ig (1mg/kg)只降低关节滑膜组织增生、细胞浸润、血管翳形成、炎症评分,和脾脏动脉周围淋巴鞘细胞密度评分。各用药组对CIA小鼠下降的体重无明显影响。3. TACI-Ig能抑制CIA小鼠B、T淋巴细胞功能,并调节CIA小鼠B、T淋巴细胞亚群的变化TACI-Ig(1、3和9mg/kg,皮下注射,每周三次,给药六周)可以降低CIA小鼠的胸腺指数,降低脾脏CD19~+、CD19~+IgD~+、CD19~+IgM~+和CD19~+CD21~+细胞的百分含量,降低胸腺CD4~+CD69~+和CD4~+CD154~+的细胞百分含量,升高CD4~+CD62L~+的细胞百分含量;TACI-Ig (3和9mg/kg)可以降低CIA小鼠的脾脏指数,降低CIA小鼠B、T淋巴细胞增殖反应,降低血清BLyS和IgA水平,抑制CIA小鼠脾脏中CD20的表达,降低CD19~+CD23~+细胞的百分含量;只有TACI-Ig (9mg/kg)可以降低CIA小鼠的血清IgM水平,降低CD4~+CD25~+的细胞百分含量;但各剂量组对CD19~+CD27~+和CD3~+CD4~+的细胞百分含量没有明显影响。TACI-Ig (100μg/ml)体外用药,能够抑制CIA小鼠B、T淋巴细胞间的相互促进对方增殖的作用。这表明TACI-Ig治疗小鼠CIA的作用机制可能与抑制CIA小鼠B、T淋巴细胞功能,调节CIA小鼠B、T淋巴细胞亚群有关。结论:1. TACI-Ig对小鼠CIA有治疗作用,其最佳剂量范围主要在3.333-10 mg/kg。2. TACI-Ig对小鼠CIA的作用特点主要体现在可明显降低CIA小鼠关节炎指数,关节病理评分及脾脏病理评分,而对CIA小鼠体重无明显作用。3. TACI-Ig治疗小鼠CIA的作用机制与抑制CIA小鼠B、T淋巴细胞功能和调节CIA小鼠B、T淋巴细胞亚群的变化有关。