论文部分内容阅读
目的：子宫颈鳞状细胞癌（cervical sqamous cell carcinoma， CSCC）是女性生殖系统常见的恶性肿瘤之一，在全球范围内占女性恶性肿瘤发病率的第二位。在我国，近年来子宫颈鳞状细胞癌有发病年轻化的趋势，严重影响着妇女健康。宫颈上皮瘤变( cervical intraepithelial neoplasia，CIN)即CSCC的癌前病变，研究CIN的生物学特性及其癌变机制，对早期发现、早期诊断和早期治疗CSCC具有重要的意义。
结缔组织生长因子(connective tissue growth factor, CTGF)是高度保守的即刻早期基因CCN(CTGF，Cyr61，Nov)家族中的一员。hCTGF可在机体多种组织器官，如心、脑、肾、肺、肝及胎盘中表达。CTGF具有刺激细胞的有丝分裂和成纤维细胞增殖、介导细胞黏附和趋化作用、促进血管生成等生物学功能，尤其在肿瘤生长和血管生成方面与多种促血管生成因子，如VEGF(vascular endothelial growth factor,VEGF)、HIF-1α(hypoxia-inducible factor-1α，HIF-1α)关系密切，但内在机制尚不完全清楚。有研究结果显示，CTGF与多种肿瘤如甲状腺癌、肝癌、浸润性胃癌、肺腺癌、食管鳞状细胞癌等的发生发展有关。国外wong等[8]．应用定量逆转录多聚酶链扩增技术研究29例子宫颈鳞状细胞癌标本和18例对照标本中的表达结果提示，正常宫颈上皮表达高于宫颈鳞癌。国内目前，有关子宫颈鳞状细胞癌中CTGF表达的文献报道很少，且CTGF联合两种较强的促血管新生因子HIF-1α及VEGF，研究其在子宫颈鳞状细胞癌发生发展中的作用及相互作用机制更鲜有报道。
因此，本研究拟以免疫组化方法探讨正常宫颈鳞状上皮、宫颈上皮内瘤变、子宫颈浸润性鳞状细胞癌中CTGF,HIF-1α和VEGF的表达情况，以进一步阐明CTGF是否可以作为CIN发展成癌的一个早期标志或信号，而应用于筛查和评估高危人群，以期对于宫颈癌的早发现、早诊断有一定的临床意义。
方法：采用免疫组织化学（EliVisionTM plus两步法）检测20例正常宫颈鳞状上皮、52例宫颈上皮内瘤变（包括CINⅠ22例、CINⅡ14例、CINⅢ16例)和56例宫颈浸润性鳞状细胞癌（高中分化27例、低分化29例）中CTGF、HIF-1α、VEGF的表达情况及其相互关系，分析其在宫颈鳞状上皮癌变及其进展中的可能意义。
结果：
1 CTGF的表达情况
CTGF蛋白在正常宫颈上皮、CIN和子宫颈浸润性鳞状细胞癌组的阳性表达率分别为10.00％、44.23％和92.85％。子宫颈浸润性鳞状细胞癌阳性表达率和CIN组阳性表达率均明显高于正常组(P＜0.05)，同时，宫颈浸润性鳞状细胞癌组的阳性表达率也高于CIN组阳性表达率(P＜0.05)。从正常宫颈上皮、CIN到子宫颈浸润性鳞状细胞癌，CTGF的表达呈不断升高的趋势。进一步研究表明，CTGF的阳性表达率也随着CCIN级别的升高而增高，CINⅠ、Ⅱ和Ⅲ组中CTGF的阳性表达率分别为31.82％、50.00％和80.77％(x2=9.638，P＜0.05)，高级别CIN组（CINⅢ）中CTGF蛋白的阳性表达率均高于低级别CIN组（CINⅠ、CINⅡ）(P＜0.05)。在宫颈癌病例中，CTGF表达与肿瘤分化程度密切相关，随宫颈癌分化程度降低，CTGF表达率呈升高趋势，CTGF在高中分化宫颈鳞状细胞癌中的表达明显低于低分化组(85.16％vs100％，x2=4.513，P＜0.05)。
2 HIF-1α的表达情况
HIF-1α蛋白在正常宫颈上皮、CIN和子宫颈浸润性鳞状细胞癌组织中的阳性表达率分别为15.00％、44.23％和82.14％，从正常宫颈上皮、CIN到子宫颈浸润性鳞状细胞癌HIF-1α表达阳性率呈不断升高的趋势。宫颈浸润性鳞状细胞癌组的HIF-1α蛋白的阳性表达率明显高于正常和CIN组(P＜0.05)。同时，宫颈浸润性鳞状细胞癌组的阳性表达率也高于CIN组阳性表达率(P＜0.05)，HIF-1α,在CIN中的阳性表达率也随CIN级别的升高而增高，CINⅠ级、CINⅡ级、CINⅢ级HIF-1α蛋白的阳性表达率分别为31.82％、50.00％、80.77％(x2=10.888，P＜0.05)。其中高级别CIN组( CINⅢ)的HIF-1α蛋白的阳性表达率均明显高于低级别CIN组(CINⅠ和CINⅡ，P＜0.05)。
3 VEGF的表达情况
20例正常宫颈上皮、52例CIN和56例宫颈浸润性鳞状细胞癌中VEGF的阳性表达率分别为10.00％、53.85％和80.36％。从正常宫颈上皮、CIN到宫颈浸润性鳞状细胞癌VEGF表达呈不断增高的趋势。子宫颈浸润性鳞状细胞癌和CIN组VEGF的阳性表达率明显高于正常组(P＜0.05)，宫颈浸润性鳞状细胞癌组的阳性表达率也高于CIN组(P＜0.05)。在不同级别的CIN组织中VEGF蛋白的阳性表达率随CIN级别的升高而增高，CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ组中VEGF的阳性表达率分别为36.36％、42.86％和81.25％(x2=11.968，P＜0.05)。高级别CIN组(CINⅢ)VEGF蛋白的阳性表达率均明显高于低级别CIN组(CINⅠ和CINⅡ，P＜0.05)。
4 CTGF与HIF-1α及VEGF表达的相关关系
在128例正常、CIN及宫颈浸润性鳞状细胞癌病例中CTGF呈阳性表达的77例中和HIF-1α有重复阳性表达的为57例，20例呈HIF-1α阴性表达；CTGF呈阴性表达的51例中有15例呈HIF-1α阳性表达，36例呈HIF-1α阴性表达。统计学分析结果表明，本实验各组中CTGF与HIF-1α不存在相关关系(x2=24.818，P=0.402)。
CTGF呈阳性表达的77例中，VEGF阳性表达阳性率为66.23％(51/77)，而CTGF呈阴性表达的51例中，VEGF阳性表达率47.06％(24/51)。CTGF在各组病例中的表达与VEGF不存在相关关系(x2=4.657，P=O.187)。
5 宫颈浸润性鳞状细胞癌中CTGF、HF-1α和VEGF表达的临床病理意义
CTGF在宫颈浸润性鳞状细胞癌中的表达与肿瘤分化程度密切相关，高中分化鳞癌组织CTGF阳性表达率明显高于低分化鳞状细胞癌(P＜0.05)。本研究结果显示，CTGF、HIF-1α、VEGF的表达与其它临床病理因素之间无相关关系。
结论：
1从正常宫颈上皮、CIN到宫颈浸润性鳞状细胞癌CTGF的阳性率呈不断升高的趋势，且CTGF的阳性率随CIN级别的增高而增高，推测CTGF在子宫颈鳞状细胞癌癌变过程中可能发挥重要作用。在子宫颈癌中，CTGF表达与肿瘤分化程度密切相关，随宫颈癌分化程度降低，CTGF表达率呈升高趋势。
2 HIF-1α和VEGF在子宫颈浸润性鳞状细胞癌及CIN中的表达均明显高于正常子宫颈鳞状上皮。HIF-1α和VEGF的阳性率随CIN级别的增高而增高。
3 CTGF分别与HIF-1α和VEGF在子宫颈浸润性鳞状细胞癌癌变中的表达无相关性，HIF-1α和VEGF在子宫颈浸润性鳞状细胞癌癌变中的表达呈正相关性已有定性结论，本文未作两者相关性分析。