黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus, CGMMV)是烟草花叶病毒属(Tobamovirus)成员,主要侵染葫芦科作物,近年来在我国多次爆发流行,给人们带来了巨大的经济损失。目前,对于CGMMV编码蛋白的功能和病害的防治都有了一定的认识,但是对于病毒和寄主间的互作尚不清楚,本文对CGMMV编码的外壳蛋白与寄主烟草蛋白间的互作进行了研究。本文从感染CGMMV的黄瓜叶片提取总RNA,通过RT-PCR获得目的基因CGMMV-CP,并成功克隆到pMD18-T载体上,经序列测定验证后,构建成重组酵母表达载体pDB-CP。将酵母表达载体pDB-CP转化酵母菌MaV203,以含有pDB-CP的酵母菌制备酵母感受态,采用顺序转化法筛选烟草cDNA文库,转化产物涂布不同的营养缺陷型培养基,观察酵母菌生长情况并检测β半乳糖苷酶活性。结果表明,以CP为诱饵筛选获得14个阳性克隆,序列比对后只有一个克隆具有正确读码框,且与烟草ribosomal protein L14(RPL14)蛋白有很高的同源性。为进一步确定获得的阳性克隆基因所编码的全长蛋白是否与CP互作,将RPL14基因构建至酵母表达载体pDEST22,与CP共转化酵母菌MaV203,经不同的营养缺陷型培养基的筛选和β半乳糖苷酶活性的检测,结果表明RPL14和CP间存在互作。双分子荧光互补实验和免疫共沉淀实验进一步证实了CP和RPL14存在互作。亚细胞定位研究表明RPL14主要定位于细胞核和细胞质小颗粒中,CP定位于细胞质和细胞核中。