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为了更好地进行前列腺癌免疫基因治疗，我们构建一种新型的前列腺癌趋化抗原DNA疫苗，并通过基因枪介导的免疫研究其抗肿瘤效应及相关机制。 通过生物信息学技术分别从人前列腺特异膜抗原(hPSM)、小鼠前列腺酸性磷酸酶(mPAP)和人的前列腺特异抗原(hPSA)选取能表达多CTL和Th表位的DNA片段，利用RT-PCR和PCR技术将所选取的片段克隆并拼接成hPSM-mPAP-hPSA融合基因，即3P基因。以pcDNA3.1为载体在3P的5′端接次级淋巴组织趋化因子(SLC)而在其3′端接人IgG的Fc基因从而构建得新的DNA疫苗，称pSLC-3P-Fc。利用RT-PCR和Western Blotting技术分析验证pSLC-3P-Fc在其转染细胞中的表达，并应用趋化小室技术检测SLC-3P-Fc融合蛋白对人外周血淋巴细胞和小鼠脾淋巴细胞的趋化活性。构建高表达3P小鼠黑色素瘤细胞株B16F10-3P，并利用同基因型的C57BL／6纯系小鼠建立荷瘤小鼠模型，进行pSLC-3P-Fc疫苗的肿瘤预防和治疗实验，观察荷瘤小鼠的肿瘤大小及生存期。为了分析CD4~+和CD8~+T淋巴细胞亚群的的作用，我们进行了淋巴细胞亚群的体内免疫删除实验。利用转染pSLC-3P-Fc的HLA-A~*0201~+PBMC诱导自身淋巴细胞产生CTL；通过乳酸脱氢酶释放法检测HLA-A~*0201~+限制性的CTL反应，并进行pSLC-3P-Fc