Girdin在原发性肝细胞癌中的表达及其对肝癌细胞增殖和侵袭能力的影响

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目的:探讨Girdin在原发性肝细胞癌中的表达情况及临床意义;探讨特异性RNA干扰人肝细胞癌细胞中Girdin的表达对细胞增殖、侵袭的影响。方法:(1)采用免疫组化SP法检测肝癌组织芯片内40例原发性肝细胞癌组织、30例癌旁组织中Girdin的表达,分析肝癌组织中Girdin的表达水平与临床病理因素及预后之间的关系。(2)设计并合成特异性针对Girdin的小干扰RNA序列(Girdin-siRNA),通过脂质体LipofectamineTM2000转染HepG2和Huh7.5.1细胞,同时设置阴性对照组和空白对照组。实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测干扰序列对细胞Girdin mRNA表达的影响;MTT法检测细胞的增殖并绘制生长曲线;Transwell法检测细胞侵袭能力的变化。结果:(1)Girdin在肝癌中阳性表达率为100%,高于癌旁组织43.3%(P<0.001)。Girdin表达与肝癌患者的肿瘤大小、T分期、TNM分期及Edmondson-Steiner分级相关(P<0.05)。Girdin低表达组1年3年生存率分别为100%、76.9%,明显高于Girdin高表达组的59.3%、14.8%,两组患者生存率比较有显著统计学差异(P=0.001)。单因素分析显示肝癌患者总生存率与肿瘤位置、肿瘤大小、是否有血管侵犯、T分期、TNM期、Edmondson-Steiner分级及Girdin表达水平相关(P<0.05)。多因素分析显示肿瘤位置、TNM分期、Edmondson-Steiner分级及Girdin表达水平可能是肝癌患者预后的独立危险因素(P<0.05)。(2)Real time-PCR结果表明特异性针对Girdin的小干扰RNA序列可以抑制HepG2和Huh7.5.1细胞中Girdin的表达。MTT结果显示Girdin siRNA组细胞的生长速度明显低于阴性对照组和空白对照组(P<0.01)。Transwell实验结果表明Girdin siRNA组细胞的侵袭能力弱于阴性对照组和空白对照组(P<0.05)。结论:(1)Girdin蛋白在肝癌组织中表达明显增高;肝癌组织中的Girdin表达水平与肿瘤大小、T分期、TNM分期、Edmondson-Steiner分级正相关;Girdin表达可能是原发性肝细胞癌不良预后的参考指标。(2)特异性针对Girdin的siRNA序列可以有效地抑制HepG2和Huh7.5.1细胞的增殖及侵袭能力。
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