Egr-1的特异性脱氧核酶对大鼠颈总动脉损伤后内膜增生的影响

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前言 经皮冠状动脉介入治疗(percutaneous coronary intervention,PCI)是公认的治疗冠心病的有效方法之一,但术后6个月内再狭窄发生率仍可达到20%-30%,严重地影响了该项治疗技术的远期疗效。目前认为,动脉平滑肌细胞的过度增生是PCI术后再狭窄的重要病理特征。Egr-1是立早基因(IEGs)家族的一员,是一种重要的核转录因子,调控着多种与细胞增殖相关基因的表达,因此与细胞增殖关系密切。 脱氧核酶(deoxyribozyme,DRz)是具有酶活性的DNA分子,DRz10-23是其中的一种,它由15个脱氧核苷酸构成催化特异性结构域,两边分别连有7-8个脱氧核苷酸构成底物识别结构域,RNA底物通过Waston Crick碱基配对形式与酶结合,未配对的嘌呤和配对的嘧啶之间构成特异性磷酸二酯键切割位点,从而将底物RNA切断。本研究设计了针对大鼠Egr-1的特异性脱氧核酶DRz10-23(ED5),作用于损伤后的动脉内膜,观察其对大鼠颈总动脉损伤后内膜增生的影响,探讨其作用机制。 实验方法 2F Fogarty导管对雄性Wistar大鼠行颈总动脉损伤术后,在转染试剂Fu gene 6介导下经血管腔内转染Egr-1的特异性脱氧核酶(ED5),以假手术组、单纯损伤组及空白转染试剂组(Fu gene 6组)作为对照,于术后3、7、14和21天4个时间点取材,检测内膜增生程度及增殖细胞核抗原(PCNA)、转化生长因子-β1(TGF-β1)和Egr-1的表达变化。结果采用SPSS10.0统计软件处理,多组之间的两两比较用q检验,P<0.05则认为统计学上差异有显著性。
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