论文部分内容阅读
目的通过实验,观察神经再生室内八肽胆囊收缩素(CCK-8)对坐骨神经缺损修复的效果,探索CCK-8构建人工神经修复周围神经缺损的作用机制,为临床应用提供依据。材料与方法将健康Wistar大鼠随机分为三组：每组16只,实验组为A、B两组：A组为导管内注射CCK-8组,B组为腹腔内注射CCK-8组,对照组为C组(导管内注射生理盐水),实验模型采用坐骨神经缺损端置PLGA导管构建神经再生室。A组大鼠一次性在导管内注入CCK-8(56nmol/kg),B组大鼠腹腔内注射CCK-8(8nmol/kg),每天一次,一共给药7天,导管内一次性注满生理盐水。对照组C组一次性在导管内注满生理盐水。饲养大鼠12周。综合采用七个指标进行坐骨神经恢复程度评价：(1)运动行为学：分别在术后第8周和第12周时,采用肉眼观察。(2)再生神经外观形态：分别在术后第8周和第12周时,采用肉眼观察。(3)坐骨神经功能指数的恢复率(SFI%)：采用步态分析法测定。(4)神经电生理(NEP)：采用测定运动神经传导数度的恢复率(NCV%)和腓肠肌复合动作电位的恢复率(CMAP%)法。(5)再生神经组织学结构的比较：采用HE染色、固绿髓鞘染色处理再生坐骨神经标本,光镜下观察。(6)有髓神经纤维计数的恢复率(%)。(7)腓肠肌湿重的恢复率(%)。结果48只大鼠全部成活。(1)运动行为学：术后第8周,三组均见小腿肌肉萎缩A、B两组大鼠鼠爪出现部分收展及伸屈活动,A组明显,C组则无以上活动表现；术后第12周,A组实验侧小腿肌基本恢复至正常,足趾收展及伸屈活动基本正常；B组实验侧小腿肌与健侧比有差异,尚饱满,足趾收展伸屈活动尚可；C组实验侧小腿肌明显萎缩,足趾收展伸屈活动明显受限。(2)再生神经外观形态：肉眼形态：术后第8周,A组和B组管内再生神经通过,神经外观凸凹粗糙,B组明显,C组管内未见再生神经通过。术后第12周,A组再生神经纤维完全自近端长入远端,粗细基本正常,外形匀称；B组再生神经纤维基本自近端长入远端,直径较细,表面凸凹粗糙。C组再生神经纤维基本自近端长入远端,直径明显细于A组,表面明显凸凹粗糙。A组优于B组,B组优于C组。(3)SFI%：术后第8周,A组：-51.04±6.77%,B组：-61.12±8.77%,C组：-72.87±5.85%；术后第12周,A组：-34.15±5.57%,B组：-42.29±6.72%,C组：-52.99±7.80%,三组间差异有统计学意义。(4)NEP测定：术后第8周,A组NCV%：42.62±0.43%,CMAP%：64.16±0.98%,B组NCV%：35.73±0.28%,CMAP%：55.28±0.89%；C组NCV%：23.53±0.76%,CMAP%：34.97±0.71%,三组间差异有统计学意义；术后第12周,A组NCV%：57.23±0.43%,CMAP%：92.60±2.63%；B组NCV%：36.26±0.29%,CMAP%：83.40±3.00%；C组NCV%：23.50±0.61%,CMAP%：64.01±1.28%；三组间差异有统计学意义。(5)组织学结构：再生神经纤维密度高低、排列规则程度方面比较,术后第8周,A、B、C组密度和排列规则度依次递减；术后第12周,再生神经纤维排列规则度、髓鞘厚度方面比较,A、B、C组排列规则度、髓鞘厚度依次递减,A组基本正常。(6)再生有髓纤维计数恢复率测定：术后第8周A组为63.24±6.65%,B组52.08±3.37%,C组为37.69±6.37%,三组间差异具有统计学意义。术后第12周：A组为81.59±3.24%,B组72.48±5.37%,C组为62.37±7.91%。(7)腓肠肌湿重的恢复率测定：术后第8周：A组为65.45±1.20%,B组60.50±1.44%,C组为53.05±0.74%,三组间差异具有统计学意义；术后第12周,A组为78.14±0.38%,B组66.32±1.70%,C组为54.62±1.04%,三组间差异有统计学意义结论1神经缺损端局部应用CCK—8优于腹腔内注射,能更有效地促进周围神经再生,更利于肢体运动功能的恢复。2本研究为临床将CCK—8作为人工神经材料(即复合组织神经导管)修复周围神经缺损提供了实验依据。