本论文以本实验室自制的3.0μm无孔单分散亲水性交联聚甲基丙烯酸环氧丙酯树脂P(GMA/EDMA)为载体，选择四种不同的配体合成四种新型的亲合色谱固定相，并对固定相的色谱性能进行了考察，应用于实际生物样品的分离纯化，取得较好的效果。　　 本论文主要分以下几部分：　　 1.以3.0μm无孔单分散亲水性交联聚甲基丙烯酸环氧丙酯树脂P(GMA/EDMA)为载体，亚氨基二乙酸-IDA为螯合剂，制备同定化金属离子亲合色谱(IMAC)固定相Ⅰ，详细考察了固载不同的金属离子(Cu2+、Ni2+、Zn2+)对蛋白分离的影响，以及pH值，流速等对蛋白保留的影响，选用Cu2+-TDA和IDA柱应用于对粗品胰蛋白酶和鸡蛋清中溶菌酶的分离纯化，通过聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳技术测定，纯化后胰蛋白酶和溶菌酶的纯度分别达到92％和95％。　　 2.以3.0μm无孔单分散亲水性P(GMA/EDMA)树脂为载体，羧甲基天冬氨酸(CM-ASP)为螯合剂，制备固定化金属离子亲合色谱固定相Ⅱ，考察了固载金属离子Ni2+对蛋白的分离效果，以及不同色谱条件下蛋白的保留行为。应用此固定相Ⅱ对猪血中铜锌超氧化物歧化酶(Cu,Zn-SOD)进行分离纯化，纯度可达到90％。　　 3.以3.0μm无孔单分散亲水性P(GMA/EDMA)树脂为载体，制备以活性蓝F3GA(Cibacron BlueF3GA)为配体的染料配体亲合色谱固定相，将其应用于对牛血清白蛋白(BSA)和溶菌酶Lys标准蛋白的分离。详细考察了流动相中的盐离子浓度，有机溶剂及流速等对BSA和Lys蛋白质保留的影响，利用前沿色谱法测定了染料与溶菌酶之间的表观解离常数。使用该固定相可从鸡蛋清和小牛血液中分离纯化出溶菌酶(Lys)和牛血清白蛋白(BSA)，纯度分别为95％和92％。　　 4.以3.0μm无孔单分散亲水性P(GMA/EDMA)为载体，间氨基苯硼酸为配体制备了一种新型聚合物高效硼酸基亲合色谱填料。考察了抗生素(去甲万古霉素，阿米卡星，异帕米星和庆大霉素)与硼酸配体的特异性相互作用，以及流动相中盐离子浓度和pH对抗生素保留的影响，实验结果表明，表面带有邻羟基的抗生素和硼酸基能够作用，且主要作用力为硼酸基和抗生素的亲合作用。本文所合成的硼酸配基有亲合特异性相互作用。首次用所合成的硼酸基亲合色谱柱纯化去甲万古霉素，并用反相色谱测定纯化后去甲万古霉素纯度，取得了满意的效果。