最新的肿瘤干细胞理论认为,肿瘤的生长是肿瘤组织中极少量具无限增殖潜能的肿瘤干细胞恶性增殖的结果,这些肿瘤干细胞具有自我更新和分化潜能,是形成不同分化程度的肿瘤细胞、肿瘤复发和转移的根源,在启动肿瘤形成和维持其生长中发挥重要作用。目前已经在多种恶性肿瘤中发现有肿瘤干细胞的存在,例如白血病、乳腺癌、神经胶质瘤、前列腺癌、结肠癌。根据肿瘤干细胞学说,肿瘤干细胞与干细胞在许多方面具有相似之处,决定肿瘤的起始和增殖。因此,分离和鉴定肿瘤干细胞对阐明肿瘤的发病机理,揭示肿瘤复发和转移的机制具有重要的意义,并能为肿瘤的治疗提供新的策略。原发性肝癌是我国常见的肿瘤之一,复发和转移是患者死亡的主要原因之一。对肝癌的发病机理的研究表明,肝脏中具有肝祖细胞特性的卵圆细胞参与了肝癌的发生,另外肝癌组织的异质性表明,并不是每个肝癌细胞都具有形成肿瘤的能力,这提示肝癌组织中可能存在具有表型和功能特殊的细胞,分离和鉴定这群细胞是否具有干细胞特性对阐明肝癌的发病机理具有重要意义。目前,众多实验已经证实肝干细胞广泛参与肝癌的发生、发展,因此,寻找肝干细胞特异性的表面分子成为研究的关键。以CD133分子为标志成功的在多个肿瘤细胞系中分离出肿瘤干细胞。此外,在大鼠部分肝切除模型中发现CD133被重新激活,表明CD133与肝细胞的增殖密切相关。因此,以CD133为表面标志的肝癌干细胞的研究对揭示肝癌的恶性增殖、复发和转移的机制,最终阐明肝癌的发病机制具有重要意义,并为肝癌的治疗提供新的思路和策略。目的:1.检测干细胞表面标志物CD133在肝癌组织中的表达及其与临床特征的关系,初步探讨其与预后的相关性;2.观察纯化的CD133肿瘤细胞在体内、体外生物学特性,进一步探讨肝癌细胞系中CD133阳性亚群的增殖特性。方法:1.采用免疫组织化学Envision二步法检测52例临床肝细胞癌组织中CD133及Ki-67的表达,对照组为正常肝组织6例,并与临床病理学指标和术后生存率进行比较分析;2.流式细胞荧光激活分选技术检测肝癌细胞系Huh-7中CD133的表达;3.体外培养并观察其增殖、成瘤及分化能力。结果:1.在52例肝癌组织中,CD133的平均染色强度为1.07±0.32,Ki-67在肝癌组织阳性表达率为57.7%,但正常肝组织未见CD133及Ki-67的阳性表达;2.CD133、Ki-67的表达和肝癌的病理分化程度(P<0.05)、临床分期(P<0.05)密切相关,但与患者年龄、性别、肿瘤的大小无关;3.32例肝癌患者的完整的随访资料表明,CD133表达阳性患者的5年生存率为28.7%,中位生存时间为34.2月,阴性表达患者5年生存率为44.8%,中位生存期时间为45.4月,两组间差异有统计学意义(P<0.05);4.流式细胞仪检测肝癌细胞系Huh-7中有62.3%的细胞呈CD133阳性表达,体外培养显示CD133阳性亚群增殖能力强于阴性细胞亚群;5.CD133阳性细胞亚群裸鼠成瘤能力明显强于阴性细胞;6.CD133阳性细胞亚群体外培养具有较强的体外分化能力。结论:1. CD133阳性细胞亚群在临床肝癌组织中广泛表达;2.CD133、Ki67在恶性程度较高、临床分期差的肿瘤中呈强表达,可能影响肝癌患者的预后,支持肿瘤干细胞学说;3.CD133阳性细胞亚群具有较强的增殖、成瘤和分化能力,是具有肝癌干细胞特性的细胞亚群。