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花生四烯酸（ARA）是一种人体必需的功能性脂肪酸，高纯度ARA可作为营养强化剂、医疗保健品以及制药原料参与调节人体生理机能。本课题研究目的是建立连续高效的分离纯化高纯度ARA工艺，得到纯度较高的ARA产品。试验以含有ARA的微生物油脂为原料，通过对微生物油脂进行预处理、D72-Ag+树脂色谱柱分离纯化ARA甲酯以及模拟移动床色谱分离纯化ARA甲酯，摸索出分离纯化ARA甲酯的较优工艺条件，从而得到高纯度ARA，为ARA的工业化生产提供可靠的技术支持。1.应用气相色谱—质谱联用技术分析了微生物油脂经皂化水解、尿素包合、BF3-CH3OH法甲酯化后的微生物油甲酯脂肪酸的组成，共有6种脂肪酸被分离和鉴定出来。采用面积归一法对各脂肪酸的相对百分含量进行计算。结果表明，初纯后的微生物油脂中含有棕榈酸、亚油酸、硬脂酸、花生四烯酸、山嵛酸、二十四烷酸，其含量分别为6.87%、19.04%、7.96%、46.64%、6%、9.02%。2.采用D72-Ag+树脂色谱柱分离纯化经尿素包合初纯后的微生物油甲酯中的ARA甲酯，气相色谱检测ARA甲酯含量。以ARA甲酯纯度和收率为指标，研究了分离纯化ARA甲酯的工艺条件。负载Ag+D72树脂的最大饱和吸附量为9mg/g干树脂，在吸附温度0℃，PUFA甲酯上样质量浓度5mg/mL，5%丙酮正己烷溶液（体积比）洗脱，解吸温度30℃，洗脱流速2mL/min的条件下ARA甲酯纯度达到89.4%，收率达到79.3%。3.采用模拟移动床色谱分离纯化经尿素包合初纯后的微生物油甲酯中的ARA甲酯，并以ARA甲酯的纯度和收率为指标对其分离工艺进行优化。试验确定了最佳进样浓度为20mg/mL、切换时间720s，同时还确定了进样流速、洗脱流速、解吸流速以及再生流速4个因素的中心范围，通过四元二次回归正交旋转组合试验对各中心范围值进行优化，优化出最佳的模拟移动床色谱分离纯化ARA甲酯的工艺参数为：进样流速39.3mL/min、洗脱流速8mL/min、解吸流速4.5mL/min、再生流速5.5mL/min。各区最优分配及连接方式：吸附区8根色谱柱串联，洗脱区4根色谱柱串联，解吸区5根色谱柱串联，再生区3根色谱柱串联。该条件下得到的ARA甲酯纯度为91%，收率为92.9%。