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多环芳烃(PAHs,polycyclic aromatic hydrocarbons)是一种广泛存在的有机污染物,具有潜在的致癌、致畸、致突作用。由于PAHs具有稳定的化学结构及极强的疏水性使得其具有抗降解、积聚的特性,长期且稳定的存在于各种环境介质中。我国北方冬季气温低,最适生长温度在20℃以上的降解菌活性受到抑制,需要筛选出在低温条件下具有抗性且对PAHs具有强降解能力的菌株。本研究应用传统微生物培养技术,对大庆油田附近污染土壤中的细菌进行群落结构解析。结果共分离出细菌164株25种,细菌数量在(0.54~1.04)×10~6 CFU/mL之间,结合菌株形态学观察、生理生化特征对菌株鉴定,共鉴定出12属。其中存在两种明显优势菌属,它们是芽孢八叠球菌属(Sporosarcina)和假单孢菌属(Pseudomonas),其余皆为常见菌属。对于污染场地土壤中的可培养微生物,应用富集培养方法和污染物浓度梯度驯化法,在低温条件下分离得到5株以萘、4株以菲作为唯一碳源生长的菌株。综合形态学观察、《伯杰细菌鉴定手册》第八版对生理生化鉴定结果、分子生物学鉴定结果共同表明:1号菌属于短杆菌属(Brevibacterium),5号菌属于产碱杆菌属(Alcaligenes),B号菌属于不动杆菌属(Acinetobacter)。其余菌均属于假单胞菌属(Pseudomonas)。对所有菌株进行10 d的降解能力测定,低温萘降解菌1、2、3、4、5号菌第10 d对萘的降解率分别在75%至99%不等,其中3、4号菌降解效率较高,重新命名为GN1和GN2。低温菲降解菌A、B、C、D号菌第10 d对菲的降解率分别在50%至70%不等,其中A、B号菌降解效率较高,重新命名为GP1和GP2。通过降解能力测试,选择具有高效降解能力的菌株进行生长特性测定。确定了两株低温萘降解菌的最佳生长条件均为:萘浓度300 mg/L,pH值为7.0,培养温度10℃,培养转数120 r/min。两株低温菲降解菌最佳生长条件均为:pH值为7.0,培养温度10℃,培养转数120 r/min,同时菲-无机盐培养基中菲的浓度水平对GP1和GP2降解菌生长影响程度类似,五个浓度水平皆可。