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目的:研究鞘内注射(it)醋酸泼尼松龙(prednisoloneacetate,PA)对背根节慢性压迫实验模型(theexperimentmodelforchroniccompressionofdorsalrootganglion,CCD)大鼠痛阈和脊髓背角酪氨酸磷酸化NMDA受体2B亚型(P-NR2B)阳性神经元及脊髓P-NR2B蛋白的影响,探讨醋酸泼尼松龙镇痛作用的脊髓机制。
方法:实验用雄性SD大鼠78只,随机分为13组,采用行为学检测(n=6)、P-NR2B免疫组织化学技术(n=6)和免疫印迹(Immunoprecipitation-Westernblot,Ip-Wb)技术(n=4)三种实验方法,每种实验方法均分为假手术组(shame组)、人工脑脊液组(ACSF组)、PA组(0.5mg·kg-1、1.0mg·kg-1、2.0mg·kg-1)。采用von-Freyfilaments机械刺激法和热辐射刺激法评定大鼠疼痛行为,术后第7天、14天分别运用免疫组织化学法和Westernblot技术检测脊髓背角P-NR2B阳性神经元与脊髓P-NR2B蛋白的表达。
结果:与术前基础痛阈相比,除假手术组外,背根节压迫后第2天开始其余各手术组的机械刺激痛阂和热辐射痛阈均出现明显地下降(P<0.01),其中ACSF组与PA0.5、1.0组可以长时间地维持(至术后第14天)。从术后第5天开始,PA.2.0组痛阈升高(P<0.01),术后第7天机械刺激痛阈已较术前基础痛阈无统计学差异(P>0.05),但热辐射痛阈直至术后第12天才恢复至术前水平(P>0.05)。免疫组织化学方面,背根节压迫后第7/14天,ACSF组与PA0.5、1.0组脊髓背角P-NR2B阳性神经元数量分别为22±7/21±5、19±5/18±6、17±6/14±4,较shame组(2.7±1.2/1.8±0.8)和PA2.0组(6.8±2.8/2.3±1.4)明显增多(P<0.01),但后三组之间比较差异无显著性(P>0.05)。PA2.0组和shame组相比,第7天差异具有显著性(P<0.01),而第14天差异则无显著性(P>0.05)。Westernblot检测与免疫组织化学的结果基本一致,不同的是,PA2.0组与sham相比,第7天、14天均有统计学意义(P<0.05)。
结论:1、鞘内注射醋酸泼尼松龙能减轻CCD大鼠的痛敏反应并抑制CCD大鼠脊髓水平磷酸化NR2B阳性神经元和蛋白的增多,上述作用具有时间和剂量依赖性;2、磷酸化的NR2B可能在CCD大鼠痛觉过敏的形成及维持过程中起重要作用。