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淀粉是稻米胚乳的主要成分,在一定程度上决定了稻米的品质,淀粉合成是通过多种酶协同催化完成,其中淀粉去分支酶(Starch debranching enzyme,DBE)对淀粉最终结构的形成起着非常重要的作用,因此,对DBE的深入研究有助于解释淀粉生物合成机理。淀粉去分支酶包括普鲁兰酶(PULL)和异淀粉酶(ISA),异淀粉酶又包括ISA1、ISA2、ISA3三种同工型。本研究利用根癌农杆菌介导的转基因技术将PULL基因RNA干扰结构和ISA3基因RNA干扰结构导入受体品种日本晴中,且从2类干扰材料的杂交后代中通过PCR筛选到不同转化子来源的双基因干扰纯系。本实验中所用到的材料有的PULL和ISA3双干扰株系(PULL/ISA3-RNAi)四个,PULL干扰株系(PULL-RNAi)4个,ISA3干扰株系(ISA3-RNAi)3个和一个未转化对照。对获得的双干扰纯系和其亲本,以及未转化对照进行表达量分析,并测定稻米淀粉的理化特性和结构特性,以研究PULL、ISA3基因对稻米品质的影响。主要研究结果如下：(1)对双干扰材料及相关亲本水稻胚乳总RNA的Real-time PCR分析结果表明,单基因干扰材料中,PULL或ISA3基因的表达量不同程度的降低,且达到极显著水平。双基因干扰材料中PULL和ISA3的表达量与其对应的单基因干扰亲本材料相比无显著性差异。表明RNAi结构均已经发挥了作用,成功的抑制了相关基因的表达。(2)理化分析表明尸ULL/ISA3-RNAi,PULL-RNAi和ISA3-RNAi材料的染色范围和染色程度无明显的差别。转基因植株胚乳总淀粉含量、直链淀粉含量和可溶性总糖含量和未转化对照无明显差异,表明PULL或ISA3基因的低表达没有改变胚乳中淀粉分布和植物糖原分布。(3)对转基因材料的稻米淀粉RVA测定和DSC测定结果显示,转基因材料RVA和DSC的特征值与对照相比没有达到显著性差异。(4)对转基因材料的稻米淀粉进行X-射线衍射和红外光谱全反射分析,结果表明PULL/ISA3-RNAi,PULL-RNAi和ISA3-RNAi材料淀粉粒的晶型和结晶度无明显变化。(5)转基因株系稻米淀粉精细结构分析表明,PULL-RNAi和ISA3-RNAi株系中10≤DP≤20的淀粉链较未转化对照略微减少,大部分PULL/ISA3-RNAi材料胚乳中支链淀粉中10≤DP≤35的淀粉链均比单基因干扰材料含量高,说明PULL,ISA3都影响了支链淀粉的精细结构。(6)对转基因水稻农艺性状调查发现,PULL/ISA3-RNAi材料和单基因干扰材料的有效分蘖数、主穗长、结实率整体上和未转化对照无明显差异,植株株高和结实率也没有明显的规律性变化。