丁基苯酞对脑缺血神经细胞凋亡的抑制作用及其机理研究

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缺血性脑卒中是临床上继心脏病和肿瘤后的第三大死亡原因,严重威胁人类健康,影响病人生活质量,给家庭和社会带来沉重的经济负担。对其发病机理的研究和寻找有效的治疗药物已成为当务之急。近年研究表明脑卒中后迟发性神经元死亡的主要形式是细胞凋亡,且凋亡的细胞主要集中在缺血阴影区(penumbra)。保护这部分神经元的完整性和功能是目前治疗脑卒中的目标。丁基苯酞(dl-3-n-butylphthalide,NBP)是我所近年来开发的一个新型抗脑缺血药物,具有良好的抗脑缺血作用,目前正在进行Ⅱ期临床试验。以往实验研究表明:NBP能缩小大鼠大脑中动脉阻断(MCAO)后脑梗塞面积和改善神经功能缺失。为进一步研究NBP这一作用的机理,我们提出如下假说:NBP缩小大鼠MCAO后脑梗塞面积与其抑制脑缺血后神经细胞凋亡有关。因此,本论文的研究目的是:(1)NBP对脑缺血神经细胞凋亡是否具有抑制作用;(2)如果有作用,其可能的机理有哪些。本学位论文的主要研究内容如下: 第一部分 丁基苯酞对脑缺血神经细胞凋亡的抑制作用 第一节 NBP对低氧低糖诱导的皮质神经细胞凋亡的作用 本节首先从离体水平以原代培养的大鼠胎鼠皮质神经细胞低氧低糖再复氧为模型,研究NBP对神经细胞凋亡的作用。用流式细胞术检测DNA含量及凋亡细胞百分率,透射电镜观察细胞形态学变化,DNA琼脂糖凝胶电泳和原位末段标记(TUNEL)检测DNA断裂。结果表明:低氧低糖处理的细胞随着时间的延长凋亡峰增高(6h:10%;9h:13.5%;12h:25.1%),但
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