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趋化因子CCL5、CCL8是一类具有细胞趋化活性的细胞因子,它们及其受体在细胞免疫炎症反应等多种疾病过程中发挥着重要作用,是重要的药物设计模板或作用靶点。尽管其分子量较小,且结构相对简单,但是关于趋化因子及其受体的研究受限于两方面的因素:1)天然趋化因子含量极低,而趋化因子在大肠杆菌中重组表达时极易形成包涵体,因此,对于趋化因子在大肠杆菌中毫克级、活性可溶性表达并应用于结构与功能研究和药物筛选的需求也越来越迫切。2)由于细胞免疫趋化系统的复杂性,同一个受体（CCR3）可以与多个趋化因子（如CCL5、CCL8、CCL11和CCL24等）相结合并发挥作用,因此,对于不同趋化因子与其同一受体相互作用的详细表征及其功能分析,对于更特异、高效的药物设计具有重要意义。针对以上问题,本论文以CCL8和CCL5为研究对象,首先对趋化因子在大肠杆菌体内的过量、可溶性表达方法进行了探索。通过优化载体构建方式以及系统优化诱导培养条件,实现了CCL8在大肠杆菌中的可溶性过量表达,并建立了简便有效的CCL8的纯化方法。采用该方法最终可获得纯度大于98%的CCL8蛋白约1.5 mg/L。圆二色光谱分析表明,所纯化制备的CCL8与其他典型趋化因子相似,表明其已基本正确折叠。通过石英晶体微天平（QCM）对CCL8与CCR3的体外相互作用研究表明,所制备CCL8可以与CCR3体外结合,经拟合得到其二者的平衡解离常数KD为1.22×10-7。采用同样的方法,我们对CCL5的重组制备方法进行了研究。结果发现CCL5融合蛋白可以在大肠杆菌中实现过量可溶性表达,可以获得纯度在90%以上的融合蛋白约0.4 mg/L,并通过SDS-PAGE、Western-Blot、圆二色光谱等对融合蛋白进行了初步表征。然而,融合蛋白经酶切后,CCL5会出现大量沉淀,难以获得大量酶切后的重组CCL5蛋白。在上述工作的基础上,我们以CCL5为主要研究对象,探讨了分子伴侣GroEL和GroES辅助减少大肠杆菌表达包涵体的方法。采用将分子伴侣GroEL和GroES与CCL5质粒共转化,发现分子伴侣GroEL和GroES可以显著提高CCL5的可溶性表达。通过进一步优化共转化表达条件,获得0.47 mg/L的CCL5水溶性融合蛋白产量,产量提高了17.5%,包涵体的形成量明显减少,证明分子伴侣GroEL和GroES对CCL5融合蛋白具有辅助折叠作用,可以有效减少大肠杆菌包涵体的产生。最后,本论文还对不同趋化因子（CCL5、CCL8、CCL11和CCL24）与同一受体CCR3的相互作用进行了初步探讨。与其他几个趋化因子类似,我们证明实验室制备的趋化因子CCL8可以使瞬转表达在细胞膜上的CCR3-EGFP发生内化现象,同时具有细胞趋化活性,且该趋化活性呈现明显的浓度依赖性,当趋化因子浓度为200nM时,趋化指数可达4.76。趋化实验还表明,该四种趋化因子均具有显著地细胞趋化活性,但是不同趋化因子的趋化能力具有显著差别,CCL5与CCL8的趋化活性要略低于CCL11和CCL24。此外,我们还对趋化因子引起的钙流现象进行了初步探索。本研究为明晰不同趋化因子对同一受体的偏好性激活现象提供了一定的方法和实验基础。