基于转录组与代谢组联合分析研究大型海藻龙须菜利用尿素的分子机制

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龙须菜是一种重要的高值化的经济类大型红藻,在我国东南沿海地区开展大规模养殖。氮营养盐在龙须菜的养殖过程中具有重要作用,它是影响龙须菜养殖产量和品质的关键营养元素。龙须菜养殖区的氮营养盐浓度受季节性影响比较明显,春夏季以DON为主,其含量远高于DIN。尿素是DON的重要组分,那么养殖区的龙须菜在DIN匮乏的季节中利用尿素的能力如何?利用尿素的途径与分子机制是什么?本研究以龙须菜“鲁龙1号”为研究对象,借助藻类生理学、分子生物学以及高通量测序等技术,探究龙须菜对尿素的利用能力以及代谢途径。利用人工海水和半连续培养的方式,将氮饥饿处理6天的龙须菜分成三个单一氮源组(铵盐、硝酸盐、尿素)和无机氮混合组(铵盐:硝酸盐=2:1),总氮浓度均为90μM,复氮4天,检测生理参数如氮吸收动力学、生长与光合特征、氮代谢物变化以及基因和代谢物水平的变化。结果如下:1.氮吸收动力学曲线结果:龙须菜可吸收尿素,但对尿素的吸收速度低于硝酸盐(p<0.01)。2.生长曲线和光合作用参数结果:龙须菜可以利用尿素、铵盐、硝酸盐三种氮源,不同类型氮源对龙须菜的生长的影响无差异(p>0.05)。Fv/Fm在四组氮源处理条件下没有显著变化(p>0.05)。叶绿素a和藻红蛋白的含量在尿素组最低,藻体颜色变浅。表明,龙须菜响应尿素的速度比无机氮慢,藻细胞内光合色素蛋白优先被降解,可能来完成藻细胞氮的重构和平衡,保证正常的光合活动。3.氮代谢物结果:尿素组中,龙须菜内源氨氮、硝氮、尿素、总游离氨基酸、可溶性蛋白的积累量和N%均低于其他氮源组和氮饥饿后。其中响应最明显的是总游离氨基酸的变化。结果表明,龙须菜对尿素的吸收转化效率低于无机氮。4.转录组和代谢组结果,相对于铵盐和硝酸盐组,尿素组中氮转运蛋白与氮代谢相关蛋白的编码基因表达高度上调,表明藻细胞通过增强氮代谢途径来调控其对氮的转运与代谢;此外,光合电子传递与光合磷酸化水平上升,上调卡尔文循环,增强光合固碳潜力。5.龙须菜精氨酸代谢中间产物精氨酸、瓜氨酸、谷氨酸、D-鸟氨酸、D-脯氨酸、肌酸-P等显著变化。龙须菜可能通过精氨酸脱亚胺酶途径、瓜氨酸-NO途径或者精氨酸脱羧酶途径等实现藻内精氨酸库的循环。综上,本研究揭示了龙须菜利用尿素的生理特征与分子水平的变化,初步为大型海藻利用有机氮的代谢途径提供理论参考。
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