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研究背景体外受精-胚胎移植（in vitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET）是治疗不孕症最常见且最有效的辅助生殖技术。然而,反复种植失败（recurrent implantation failure,RIF）是阻碍IVF-ET成功的最大障碍,也是当前辅助生殖领域有待攻克的一大难关。RIF病因复杂且高度异质,包括胚胎质量不佳、宫腔环境异常及全身性疾病等,而子宫内膜容受性异常仍然是目前导致RIF的关键因素之一,约2/3的胚胎反复种植失败是由子宫内膜容受性降低引起,但其机制尚不清楚,仍有待进一步探讨。随着高通量测序技术的快速发展和广泛应用,近年来众多团队对非编码RNA的功能及作用机制的研究逐渐深入。lncRNA属于非编码RNA,参与多种疾病的发生发展过程,如各种癌症、心血管疾病、神经系统疾病、内分泌疾病等,已有研究报道lncRNA表达谱在RIF患者分泌中期子宫内膜组织中存在差异,参与了RIF的发生发展过程。LOC100505912是一种尚未正式命名的lncRNA,在大脑、睾丸、子宫内膜等组织中广泛表达。前期我们通过生信分析发现LOC100505912在反复种植失败和IVF妊娠患者分泌中期的子宫内膜中存在差异表达,但迄今为止,关于LOC100505912与RIF患者子宫内膜容受性的相关性研究还未见报道。目的从临床上选取RIF患者和IVF妊娠患者助孕前一周期分泌中期的子宫内膜组织样本,利用GEO数据库中包含的基因芯片数据,通过生物信息学分析结合RT-qPCR检测,探索LOC100505912在子宫内膜容受性建立过程中的作用,明确该lncRNA的功能及其与子宫内膜容受性的相关性。研究对象与方法1.筛选并确定LOC100505912:下载GEO数据库中的数据集GSE26787和GSE111974（各选取5例有足月活产史（NC）和5例反复种植失败（RIF）的助孕患者非妊娠周期分泌中期的子宫内膜组织）,分别采用R软件中的limma包识别RIF样本与对照样本之间的差异lncRNA,利用韦恩图寻找两数据集中差异lncRNA的交集并做受试者工作特征（ROC）曲线分析,确定调控RIF患者子宫内膜容受性的关键lncRNA:LOC100505912。2.验证LOC100505912在子宫内膜组织中的表达水平及其临床意义:收集10例RIF患者和10例IVF妊娠患者助孕前一周期分泌中期的子宫内膜组织及其临床信息（年龄、BMI、AMH、基础FSH、基础LH、基础E2、AFC、移植日内膜厚度、移植日P）。采用RT-qPCR检测LOC100505912在两组患者子宫内膜组织中的表达水平,ROC曲线分析LOC100505912在RIF患者和IVF妊娠患者中的诊断价值。3.构建LOC100505912过表达载体,转染THESC,采用RT-qPCR检测转染效果。4.探索LOC100505912在子宫内膜基质细胞（ESC）蜕膜化过程和细胞增殖中的作用:设置mock组和LOC100505912组,对应的载体转染THESC后,进行体外诱导蜕膜化1-6天,分别收集D0、D2、D4和D6的细胞进行指标检测。通过RT-qPCR检测蜕膜化标志基因胰岛素生长因子结合蛋白-1（IGFBP1）和催乳素（PRL）的mRNA表达量,通过CCK-8检测不同时间点THESC在450nm处的吸光度,绘制生长曲线。结果1.生物信息学分析结果:将从数据集GES111974中筛选出的差异lncRNA与数据集GSE76787中筛选出的差异lncRNA取交集,得到2个在RIF患者子宫内膜组织中均显著上调的lncRNA:LOC100505912和PART1。ROC曲线分析结果表明,LOC100050912和PART1的曲线下面积（AUC）分别为0.79和0.73,因此我们选择LOC100505912作为调控RIF患者子宫内膜容受性的关键lncRNA进一步研究。2.临床样本的RT-qPCR检测结果:LOC100505912在RIF患者子宫内膜组织中的表达水平显著高于IVF妊娠患者。ROC曲线分析表明:LOC100505912在子宫内膜组织中的表达水平可以较好地区分RIF患者和IVF妊娠患者。3.过表达载体效果验证结果:与对照组相比,LOC100505912在过表达组中的RNA表达水平显著升高（FCLOC100050950912=549,P＜0.05）,表明过表达载体构建成功。4.细胞的RT-qPCR检测结果:质粒转染THESC后,过表达组的IGFBP1和PRL的mRNA表达量在D2、D4、D6均低于mock组,提示过表达LOC100505912抑制人子宫内膜基质细胞蜕膜化。CCK-8检测结果表明:过表达组细胞的OD450值在D2、D4、D6均低于mock组,提示过表达LOC100505912抑制细胞的增殖。结论1.非编码RNALOC100505912在RIF患者子宫内膜组织中的表达水平显著升高。2.非编码RNALOC100505912抑制子宫内膜基质细胞蜕膜化和细胞增殖。