论文部分内容阅读
本研究以陕西恒兴果汁有限公司眉县分公司在2005年8月下旬生产苹果浓缩汁后产生的苹果渣为原料,采用一次多级提取工艺提取制备苹果多糖,并与酸提果胶工艺提取果胶多糖相对比、经过分离纯化,然后对各均一多糖组分进行体外自由基消除活性分析,并采用FTIR对其结构进行初步的测定。结果表明:(1)多糖提取液以TCA法,沉淀3次脱蛋白效果最好,脱蛋白率达到23.87%,多糖损失率仅为0.40%。多糖脱色则以透析法效果最佳,脱色处理后可使多糖液透光率提高20.70%,多糖达到乳白色,符合生产上的要求。(2)采用TOYOPEARL DEAE-650M纤维素柱和TOYOPEARL HW-55F凝胶柱分别对苹果多糖进行分离纯化结果为:水提苹果多糖WMPP含WMPP1、WMPP2和WMPP3三种组分,得率分别为72、312.6和80.2g/kg。酸提苹果多糖HAMPP含HAMPP1、HAMPP2、HAMPP3以及HAMPP’1、HAMPP’2、HAMPP’3六种组分,得率分别为367.6、176.2、79.7g/kg以及141.4、237.4、101.3g/kg。酸提果胶多糖HAMPPE含HAMPPE1、HAMPPE2和HAMPPE3三种组分,得率分别为190.1、314.2和73.7g/kg。(3)水提苹果多糖WMPP、酸提苹果多糖HAMPP和酸提果胶多糖HAMPPE三种多糖半纯品以及纯品对DPPH·自由基都有一定的消除能力,并在一定的浓度范围内随着浓度增大,其消除能力也增强。(4)半抑制浓度测定结果显示,水提苹果多糖WMPP及其3种组分WMPP1、WMPP2和WMPP3对DPPH·自由基都有一定的消除能力,对自由基DPPH·的半抑制浓度IC50分别为2mg/mL、3.6 mg/mL、10mg/mL和4.8mg/mL。其中水提多糖粗品的半抑制浓度最低,也就是说其消除自由基(DPPH·)的能力最强,其次才是各纯品组分,其中最强的是WMPP1,WMPP3次之,最差的是WMPP2。(5)酸提多糖HAMPP以及其各组分HAMPP1、HAMPP2和HAMPP3对自由基(DPPH·)的半抑制浓度IC50分别为1.7mg/mL、3.4 mg/mL、6.9mg/mL和5mg/mL。其中酸提多糖粗品的半抑制浓度最低,也就是说其消除自由基(DPPH·)的能力最强,其次才是各纯品组分其中最强的是HAMPP1,HAMPP3次之,最差的是HAMPP2。(6)酸提多糖HAMPP’以及其各组分HAMPP’1、HAMPP’2和HAMPP’3对自由基(DPPH·)的半抑制浓度IC50分别为0.6mg/mL、0.5 mg/mL、4.6mg/mL和4.9mg/mL。其中HAMPP’1的半抑制浓度最低,也就是说其消除自由基(DPPH·)的能力最强,其次是酸提多糖粗品HAMPP,纯品HAMPP’2次之,最差的是HAMPP’3。(7)酸提果胶多糖HAMPPE以及其各组分HAMPPE1、HAMPPE2和HAMPPE3对自由基(DPPH·)的半抑制浓度IC50分别为4.4mg/mL、5.5 mg/mL、11mg/mL和8.4mg/mL。其中酸提果胶多糖粗品的半抑制浓度最低,也就是说其消除自由基(DPPH·)的能力最强,其次才是各纯品组分其中最强的是HAMPPE1,HAMPPE3次之,最差的是HAMPPE2。(8)各多糖纯品的FTIR红外谱均显示了多糖的结构特征,除此之外,水提多糖组分1-WMPP1的红外光谱显示了氨基结构的特征吸收峰, WMPP1很可能为一种氨基多糖并同时由α和β-D-型的吡喃甘露糖以及α-木糖组成;组分2-WMPP2可能也是一种氨基多糖,但主要由D-吡喃葡萄糖脱氧鼠李糖和α-D-吡喃木糖组成,组分3-WMPP3是一种更为简单的主要由α-D-吡喃木糖组成。(9)酸提多糖HAMPP和HAMPP’各自的三个纯品组分的FTIR红外光谱图表现出极为一致的对应相似性。它们的组分2为含有D-甘露糖及β-D-吡喃葡萄糖和α-D-吡喃木糖组成的酸性多糖;组分3则为含有β-D-甘露糖、α-D-吡喃半乳糖、β-D-吡喃葡萄糖和α-D-吡喃木糖的酸性多糖。组分1(HAMPP1和HAMPP’1)则主要由呋喃果糖以及α-D-吡喃木糖组成的含复合蛋白质组分的蛋白多糖,复合蛋白结构是其具有高活性自由基消除活性的主要原因。(10)酸提果胶多糖的三种组分均为含有D-甘露糖的两种差向异构体以及β-D-吡喃葡萄糖和α-D-吡喃木糖组成的酸性多糖。不过,从他们的红外光谱来看,这三种糖还是有差异的,可能是由于他们的分子量,单糖组成的比例不同。