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背景甲状腺的主要生理功能是合成甲状腺激素，该激素的合成需要甲状腺过氧化物酶（Thyroid peroxidase,TPO）。H2O2是TPO必需的的共作用底物，当其在甲状腺中的浓度超过一定的限度时，可以自由弥散入细胞浆和细胞核，引起细胞凋亡、DNA损害等。这些过程反复发生，就使得甲状腺持续的暴露在高浓度的H2O2和其附带效应产生的活性氧簇（Reactive oxygen species,ROS）中。谷胱甘肽过氧化物酶3（Glutathione peroxidase3,GPX3)是分布于肾脏、甲状腺等腺体上皮细胞以及血浆中的抗氧化酶，能利用谷胱甘肽作为还原基质清除H2O2、可溶性脂质氢过氧化物、磷脂氢过氧化物等，进而保护肾脏、甲状腺等腺体免受氧化损伤。然而，研究表明，在高氧化状态的甲状腺癌细胞（TPC-1细胞系），GPX3表达沉默，这种表达沉默受DNA甲基化调控。另外，在结肠癌中，GPX3敲除小鼠呈现出肿瘤数目增加，增殖能力增强以及Wnt信号活跃等，提示GPX3是潜在的抑癌基因，其功能发挥与Wnt信号通路相关。但GPX3在甲状腺癌中的功能及分子机制尚不清楚。目的1．检测GPX3对甲状腺癌细胞增殖、侵袭和转移能力的影响，探讨GPX3在甲状腺癌中是否发挥抑癌基因功能。2．探讨GPX3是否通过Wnt/β-catenin信号通路影响甲状腺癌的发生发展。3．在人乳头状甲状腺癌组织中检测GPX3的表达及甲基化状态，结合临床资料，探讨GPX3作为甲状腺癌诊断标志物的可能性。方法在不表达GPX3的甲状腺癌细胞系中通过构建病毒表达载体和细胞转染技术恢复GPX3的表达，应用增殖生长曲线（MTT）、Transwell实验检测GPX3对甲状腺癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响，Western blot检测金属基质蛋白2（Matrix metalloproteinase2,MMP-2）以及Wnt/β-catenin信号通路的关键蛋白β-catenin、p-β-catenin、c-Myc和cyclinD1的表达。在94例人乳头状甲状腺癌组织标本中应用免疫组化和甲基化特异性PCR检测GPX3的表达及甲基化状态，结合临床资料，做相关性分析。结果1．GPX3重新表达后，甲状腺癌细胞的生长速度减慢（p<0.01）、侵袭和迁移的细胞数目减少（p<0.001），MMP-2的表达减低。2．GPX3再活化后，β-catenin、c-Myc和cyclinD1的表达减少，而p-β-catenin表达增多。3．GPX3在乳头状甲状腺癌中的表达低于癌旁组织（p<0.001），与GPX3的甲基化水平呈负相关(p=0.037)，GPX3的甲基化和低表达均与淋巴结转移相关(p分别为0.001、0.033)。结论GPX3的激活通过Wnt/β-catenin信号通路抑制了甲状腺癌的进展，在甲状腺癌中发挥抑癌基因作用。GPX3甲基化与乳头状甲状腺癌进展密切相关，可能成为诊断乳头状甲状腺癌的标志物。