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玫瑰(Rosa rugosa Thunb.)是蔷薇科蔷薇属的一种重要的观赏植物,花型秀美,芳香四溢,色彩绚丽。因其特有的芳香、花色及抗寒性、抗旱性,在环境条件日益恶化的今天,在园林应用中有着巨大的发展潜力。从玫瑰花瓣中提取的精油,是世界名贵的精油之一,素有“液体黄金”之称。然而,一直以来人们对玫瑰的研究还只是局限在栽培管理上,随着分子生物学和生物技术的迅猛发展,利用生物技术手段来改良植物性状也成为了可能。近年来,利用MYB类转录因子对观赏植物进行性状改良如花色、花香的研究,逐渐成为研究的热点。本研究采集玫瑰花瓣混合样进行转录组测序,并提取了高质量的花瓣混合样总RNA,反转录合成cDNA。从转录组测序结果中筛选出13个MYB基因的EST序列,以此设计引物,从玫瑰基因组DNA中扩增出每个MYB基因的gDNA片段。然后,采用TAIL-PCR技术对gDNA片段两侧的未知序列进行扩增,直至扩增出两端的UTR区。最后,在MYB基因两端的UTR区设计上下游引物,扩增玫瑰MYB基因的gDNA全长和cDNA全长。本研究挑选了6个MYB基因的全长分别构建超量表达载体,计划在后续的实验中转化野生烟草,研究其功能。本研究的主要结果如下:1.从转录组测序结果中,筛选出13个MYB基因,采用普通PCR和TAIL-PCR技术相结合的方法,扩增出全长。其中属于R1/R2类型的MYB基因有RrMYB8和RrMYB10,属于R2R3-MYB的有RrMYB1、RrMYB2、RrMYB3、RrMYB5、RrMYB6、RrMYB7、RrMYB9、RrMYB11、RrMYB12和RrMYB13,属于R1R2R3类型的MYB基因有RrMYB4。经过对NCBI上已报道的MYB基因进行蛋白质的氨基酸序列比对,发现扩增出的MYB基因中都包含DNA结合结构域等MYB基因的结构特点,初步认定所扩增出的基因均为MYB基因。2.本文构建了六个超量表达载体。选取R1/R2类型的RrMYB8基因的cDNA构建了pCAMBIA2300s-RrMYB8载体;选取R2R3类型的RrMYB1基因的cDNA、RrMYB2基因的gDNA、RrMYB5基因的gDNA、RrMYB6基因的cDNA和RrMYB7基因的cDNA,分别构建了PMV-RrMYB1载体、pCAMBIA2300s-RrMYB2载体、PMV-RrMYB5载体、PMV-RrMYB6载体和PMV-RrMYB7载体,并且把重组质粒电转化农杆菌EHA105保存。