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目的：研究小鼠自身免疫性心肌炎(Autoimmune Myocarditis,AMC)心肌细胞问粘附分子.1的变化及三七总皂甙干预作用.
方法：实验选用72只近交系4-5周龄雄性BALB/C小鼠,随机均分为对照组(C组)、自身免疫性心肌炎组(A组)和三七总皂甙组(P组).A组和P组复制自身免疫性心肌炎模型.P组腹腔注射三七总皂甙进行干预.于第14、21和30天随机处死各组小鼠8只,留取心脏标本.光镜观察心肌组织病理学改变及并采用el-Khatib法计算心肌炎症积分;电镜观察心肌组织超微结构的改变;间接ELISA法检测血清抗肌球蛋白抗体;化学发光免疫法检测血清心肌肌钙蛋白I(cTnI)水平;免疫组化法检测心肌组织细胞间粘附分子-1(ICMA-1)蛋白表达.
结果：
1.心肌病理改变:C组小鼠心肌细胞正常;A组小鼠免疫接种后第14天,心肌细胞之间及心肌内的小血管周围已有少量炎症细胞浸润.第21天炎症达到高峰,心肌细胞可见局灶性坏死区,周围出现以淋巴细胞和单核细胞为主的大量炎症细胞浸润.第30天,小鼠心肌炎症细胞浸润明显减少,但可见钙化灶形成,部分心肌可见纤维化;P组与A组相同时点比较心肌组织炎症细胞浸润和心肌细胞坏死明显减轻.
2.心肌炎症积分比较:A组心肌炎症积分在第14天已有增高,到第21天达到高峰,之后呈下降的趋势,均显著高于C组(均P<0.01).P组在第21天和30天的心肌炎症积分均小于A组(P<0.01和P<0.05).
3.心肌组织电镜观察:C组小鼠心肌细胞纤维排列整齐,Z线清晰可见,线粒体排列整齐.A组小鼠免疫接种后第14天的心肌细胞在电镜下的超微结构改变尚不明显,仅见肌浆网部分扩张,线粒体轻度水肿,基质变淡,嵴孔隙加大;第21天时可观察到心肌细胞核膜间隙扩大,染色较深,染色质固缩,聚集在边缘;局灶性肌原纤维排列紊乱,线粒体膜消失,嵴的结构模糊不清,可见线粒体聚集现象;大部分肌纤维中细胞核未见核仁,异染色质增多;心肌细胞间可见单核巨噬细胞浸润,溶酶体丰富:第30天的小鼠心肌细胞变化与21天相似,但可见脂质沉积,线粒体改变仍较明显.P组小鼠心肌损伤明显较A组减轻.
4.血清抗肌球蛋白抗体比较:A组各个时点小鼠血清抗肌球蛋白抗体均高于C组(均P<0.01).第21天血清的抗体滴度显著高于第14天和第30天(P<0.01).P组与A组相比,血清抗肌球蛋白抗体明显下降(P<0.01).
5.血清cTnI含量比较:免疫接种后第14天A组小鼠血清eTnI含量已达高峰,显著高于C组(P<0.01),随后呈下降趋势.P组与A组比较,cTnI含量在第21天和第30天均有明显下降.(P<0.01和P<0.05).
6.心肌组织ICMA-1表达:C组仅见少量ICMA-1表达;A组与C组相同时点比较ICMA-1表达均明显增强(均P<0.01);P组第21、30天ICMA-1表达与A组相同时点比较均明显减弱(P<0.05,P<0.01).
结论：1.猪心肌球蛋白可诱导产生自身免疫性心肌炎2.自身免疫性心肌炎时心肌组织ICMA-1蛋白的表达上调3.三七总皂甙可能通过下调心肌组织ICMA-1蛋白的表达而减轻心肌损伤.