比较两种富血小板纤维蛋白诱导兔硬腭软组织缺损修复再生的实验研究

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目的:通过对比观察两种富血小板纤维蛋白(Platelet-Rich Fibrin,PRF)和(Advanced Platelet-Rich Fibrin,A-PRF)诱导兔硬腭软组织缺损修复再生的实验效果,分析两种生物材料的应用特点及优势,为口腔临床中软组织再生材料的选择提供参考依据。方法:将54只日本大耳白兔随机分为3组(APRF组、PRF组、空白对照组),每组18只,于每只动物硬腭前部中份(前缘距上颌后排门齿2mm,左右缘距硬腭黏膜边缘2mm)制备硬腭软组织缺损模型。APRF组缺损区植入自体APRF膜;PRF组缺损区植入自体PRF膜;空白对照组缺损区不做任何处理。在术后3天、7天、11天、15天、21天、28天先对各组动物术区进行形态学观察并进行创面愈合率(Wound healing rate,WHR)分析,再处死取材行HE染色、Masson染色、CD105免疫组织化学染色、羟脯氨酸(Hydroxyproline,HYP)及四种生长因子(血小板衍生生长因子,Platelet-Derived Growth Factors,PDGF;转化生长因子β1,Transforming Growth Factor-β1,TGF-β1;血管内皮生长因子,Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF;肿瘤坏死因子,Tumour Necrosis Factor-α,TNF-α)酶联免疫ELISA定量分析;观察炎性反应、血管新生、胶原蛋白及胶原纤维形成情况及各时间节点生长因子释放情况,所获得的数据用SPSS23.0分析软件进行处理。结果:1.形态学观察:在创伤愈合早期(术后7天内),APRF、PRF组创面炎性反应轻微,空白对照组炎症反应明显;术后15天,APRF组、PRF组创面黏膜上皮覆盖完整,无组织凹陷,无瘢痕形成。空白对照组在愈合过程中出现了不同程度的组织凹陷,且最终有瘢痕组织形成。2.创面愈合率:术后3天,三组无明显差异(P>0.05);术后7天、11天,APRF组与PRF组之间无明显差异(P>0.05),APRF组、PRF组与空白对照组之间差异显著(P<0.05)。即APRF组与PRF组的创面愈合率无统计学差异,但两者均明显高于空白对照组。3.HE染色炎性评分:术后3天,空白对照组较APRF组、PRF组高,差异显著(P<0.05),APRF组与空白对照组之间无明显差异(P>0.05);术后7天,空白对照组>PRF组>APRF组,差异显著(P<0.05);术后11天,APRF组与PRF组无明显差异(P>0.05),两者均小于空白对照组,差异显著(P<0.05);术后15天、21天、28天三组无明显差异(P>0.05)。4.CD105免疫组织化学染色CD105平均光密度值:术后3天,APRF组>空白对照组,差异显著(P<0.05),APRF组与PRF组、PRF组与空白对照组之间无明显差异(P>0.05);术后7天,APRF组>PRF组>空白对照组,两两比较差异显著(P<0.05);术后11天,APRF组与PRF组之间无明显差异(P>0.05),两者均大于空白对照组,差异显著(P<0.05);术后15天、21天,APRF、PRF组之间无明显差异(P>0.05),两者均大于空白对照组,差异显著(P<0.05);术后28天,三组无明显差异(P>0.05)。5.Masson染色胶原纤维平均光密度值:术后3天,三组无明显差异(P>0.05);术后7天、11天、15天,APRF组>PRF组>空白对照组,两两比较差异显著(P<0.05);术后21天,APRF组与PRF组、APRF组与空白对照组之间无明显差异(P>0.05),PRF组<空白对照组,差异显著(P<0.05);术后28天,APRF组<PRF组<空白对照组,两两比较差异显著(P<0.05)。6.酶联免疫ELISA定量分析羟脯氨酸浓度值:术后3天、7天、11天、15天,APRF组与PRF组之间无明显差异(P>0.05),两者均高于空白对照组,差异显著(P<0.05);术后21天、28天,三组无明显差异(P>0.05)。血小板衍生生长因子(PDGF)浓度值:术后3天,三组无明显差异(P>0.05);术后7天、11天,APRF组>PRF组>空白对照组,两两比较差异显著(P<0.05);术后15天、21天,APRF组与PRF组无明显差异(P>0.05),两者均高于空白对照组,差异显著(P<0.05);术后28天,三组无明显差异(P>0.05)。转化生长因子(TGF-β1)浓度值:术后3天、28天,APRF组与PRF组之间无明显差异(P>0.05),两者均高于空白对照组,差异显著(P<0.05);术后7天、11天、15天、21天,APRF组>PRF组>空白对照组,两两比较差异显著(P<0.05)。血管内皮生长因子(VEGF)浓度值:术后3天、7天,APRF组>PRF组>空白对照组,两两比较差异显著(P<0.05);术后11天、15天、21天、28天,APRF组与PRF组之间无明显差异(P>0.05),两者均高于空白对照组,差异显著(P<0.05)。肿瘤坏死生长因子(TNF-α)浓度值:术后3天,APRF组、PRF组均高于空白对照组,差异显著(P<0.05);术后7天、11天,APRF组>PRF组>空白对照组,两两比较差异显著(P<0.05);术后15天、21天,APRF组高于PRF组、空白对照组,差异显著(P<0.05),PRF组与空白对照组之间无明显差异(P>0.05);术后28天,三组无明显差异(P>0.05)。结论:1.APRF、PRF均能减轻创伤区域的炎症反应,在创伤愈合早期(术后7天内),PRF抗炎能力较强,在创伤愈合中期(术后7-15天),APRF抗炎能力较PRF更强。2.在促进血管再生方面,APRF作用效果较PRF更好。3.在创伤愈合早期(术后7天内),APRF促进胶原纤维沉积的能力优于PRF,在创伤愈合中后期(术后15-21天),APRF、PRF均能对胶原纤维的降解进行调节,以APRF作用效果更好;两者均能减少瘢痕组织的形成,提高创面愈合质量。4.与PRF相比,APRF能够释放更多与软组织愈合相关的生长因子。
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