论文部分内容阅读
目的:观察MEBT/MEBO在糖尿病足溃疡大鼠创面愈合过程中的作用,探讨其促进创面愈合的作用机理。 方法:健康雄性SPF级SD大鼠100只,体重(200~250)g。常规饲养一周后,随机分为:空白对照组(20只)、糖尿病造模组(80只)。第一步,糖尿病大鼠模型制备:80只糖尿病造模组大鼠尾静脉注射链脲佐菌素STZ,制备糖尿病大鼠模型,7d后测血糖,血糖大于16.7mmol/L为糖尿病模型制备成功标准,成功64只,16只未达到糖尿病血糖值,从64只糖尿病模型制备成功的大鼠中随机选取60只,分为3组,每组20只:MEBT/MEBO组、贝复济组、模型组,以做进一步处理。第二步,全层皮肤缺损开放性创面模型制备:将20只空白对照组大鼠和60只糖尿病模型组大鼠建立全层皮肤缺损开放性创面模型。造模成功后次日开始用药,各组大鼠创面给予相应治疗药物,每日定时换药2次。肉眼观察用药后第3d、6d、12d各组创面愈合情况、肉芽组织生长情况,记录创面愈合时间;于造模后第6天取创面肉芽组织,采用光学显微镜观察创面组织形态学变化;采用RT-PCR法观察创面肉芽组织中β-catenin mRNA和Smad3 mRNA表达的情况。实验结果使用SPSS17.0软件进行统计学分析,计量资料采用单因素方差分析,结果用( x±s)表示,P<0.05表示有差异,有统计学意义。 结果:(1)造模后第6天,对照组、MEBO组、贝复济组大鼠创面肉芽组织的生长情况明显较模型组好,创面比较红润,见散在肉芽颗粒生长其上。模型组大鼠创面比较苍白,偶可见肉芽颗粒生长。(2)对照组大鼠创面平均愈合时间为12.80±2.46(天),与MEBO组大鼠创面平均愈合时间14.10±2.93(天)无差异,MEBO组大鼠创面平均愈合时间稍短于贝复济组16.20±3.99(天),明显短于模型组19.57±2.79(天),MEBO组与贝复济组、模型组在愈合时间方面相比均有统计学意义(P<0.05, P<0.01)。(3)用药后第6天,光镜下,对照组见炎性细胞较之其他组最少,成纤维细胞数量最多,真皮内较少中性粒细胞、淋巴细胞,创面肉芽组织中较多毛细血管分布。MEBO组镜下成纤维细胞数量较多,细胞较大,胞浆多,且创面肉芽组织中毛细血管较模型组更加丰富,毛细血管数内径较大。贝复济组镜下见较多的中性粒细胞、浆细胞和淋巴细胞等炎性细胞浸润,有较多成纤维细胞,其细胞体与MEBO组相比外形较小,胞浆突起不明显,少量新生胶原纤维排列紊乱。毛细血管数目略有增加,血管内径较小。模型组的大鼠肉芽组织含大量胶原纤维,毛细血管的管腔变窄,血管内皮细胞出现退化,胞浆空泡性变性,细胞器减少且肿胀,核膜断裂,核染色质见浓缩。对照组,MEBT/MEBO组,贝复济组组织生长情况明显优于模型组。(4)用药后第6天,模型组大鼠Smad3 mRNA的表达显著高于对照组、MEBO组、贝复济组大鼠(P<0.01),而MEBO组与贝复济组无明显差异(P<0.05);模型组大鼠β-catenin mRNA的表达显著低于对照组、MEBO组、贝复济组(P<0.01),而MEBO组与贝复济组无明显差异(P<0.05),具有统计学意义。 结论:(1)MEBO能有效缩短实验性糖尿病足溃疡大鼠创面愈合时间,具有促进糖尿病足溃疡大鼠创面愈合的作用。(2)MEBO可抑制Smad3 mRNA和提高β-catenin mRNA在实验性糖尿病足溃疡大鼠创面修复中的表达水平,以修复损伤创面,从而促进肉芽组织形成,加速创面愈合。