Bt菌发酵液水溶性活性物质的检测和应用

来源 :桂林理工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yczhudong
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目前,Zwittermicin A(ZwA)作为一种具有抑菌和增效双重功能的抗生素,虽然其化学结构以及某些化学性质已经阐明,但是该物质的分离纯化制备等问题一直未得到彻底解决。随着Bt制剂的广泛应用,ZwA在增效性能上的应用不断扩大,如何得到ZwA高纯度样品以及实现样品中其含量的检测尤为重要,为了拓宽和实现ZwA在农业上更大的应用,急需ZwA定量方法的支撑,本研究的目的就是为了解决上述瓶颈问题。1、纯化得到纯度84%~91%的样品的流程。ZwA纯化的流程:(1)将Bt菌发酵液进行浓缩、醇沉、离心得粗提液;(2)粗提液进行冻干,无水乙醇进行萃取;(3)使用500D透析袋纯化,反复透析后收集透析液;(4)使用固相萃取柱进行洗脱,收集10%甲醇的洗脱液部分;(5)使用高效液相亲水型色谱柱HILIC三元流动相洗脱,ZwA在3.1~3.2min时洗脱下来;根据该方法纯化制备最终得到纯度84%~91%的ZwA样品。2、建立了Bt发酵液中ZwA的高效液相色谱检测方法。Bt发酵液成分复杂,实现ZwA的高效液相检测,高效液相色谱柱的选用和合适的洗脱方法是关键。本实验选用HILIC色谱柱(4.6×250mm,3μm),以1.0mL/min乙腈-甲醇(25:75)为流动相,15min乙腈-甲醇-水(25:72:3)为流动相,柱温35℃,紫外检测波长210nm。结果表明:在线性范围0~100.0μg/mL内R2为0.9986,在32.78μg/mL添加水平下ZwA的加标回收率为93.2%~97.5%,RSD为1.28%,该方法精密度重复性良好,能适用于检测各种发酵液中的ZwA的含量。3、建立了分光光度法定量检测Bt发酵液中ZwA含量的方法。方法的原理是根据ZwA的结构中含有(NH2CONH2)的结构,此结构的物质可以在酸性条件下与二乙酰一肟反应,生成红色物质在480nm有特殊吸光值。实验以二乙酰一肟为显色剂,分别对酸添加量、反应温度和反应时间等因素进行了优化。结果:建立方法的最佳参数为磷酸的质量浓度是300mL/L、二乙酰一肟的加入量是1000μg/mL、反应液在75℃水浴中保持15min,暗处室温放置冷却,用分光光度计在480nm出测定其吸光值;ZwA含量在0~200μg/mL范围内时标准曲线的回归方程为y=0.0114x+0.07082,R2=0.99182,表明相关性良好,而且本实验不受其他物质的干扰,专属性强。4、ZwA与噻唑膦复配后对根结线虫的生物活性。以根结线虫为试虫,测定噻唑膦浓度与抑制根结线虫作用的关系;测定了不同添加量ZwA和噻唑膦配合使用对根结线虫的抑制作用,结果显示在0.2mg的添加量下30%浓度噻唑膦对线虫的增效能力达到2.711倍。
其他文献
随着移动电子设备以及移动互联网的蓬勃发展,空间众包作为一种新型的分布式问题解决方案引起了学术界和工业界的广泛关注。空间众包主要是用于完成一些基于位置的众包任务,在
信息技术的高速发展使我们进口了网络时代,现实世界中的许多事物可以表示成网络结构,如社交网络、电力网络、交通网络等。社区结构是复杂网络的重要特性,近年来受到了广泛的
随着国家在政策领域大力推广装配式建筑,当前的建筑产业正面临着一次技术变革,行业内对施工便利,性能优异的新型结构的需求方兴未艾,各种新型连接方式层出不穷,可见,在这一领域的创新将会是建筑产业新的增长点和创新点。面对新的机遇和挑战,笔者决定在研究内容较少的领域——装配式剪力墙的横向连接投入研究,并提出了一种基于钢管混凝土构件的装配式剪力墙横向连接方式,本文将通过有限元模拟的方法,研究该种连接方式的力学
2019年3月我国科创板引入了特别表决权安排的相关规则,标志着我国的双层股权结构公司不必再远赴海外上市。双层股权结构突破了传统公司法"一股一权"原则的限制,满足了异质化
无线传感器网络集信息采集、信息处传输、信息处理于一体,作为无线传感器设备间通信的桥梁,具有广阔的应用前景,是当前无线网络领域研究的热点之一。通过传统的IPv4协议配置
N-乙烯基取代氮唑类化合物在抗菌,抗癌,抗病毒等方面具有很好的生物活性,同时也是合成生物活性分子的重要有机中间体,因此该类化合物的合成一直备受关注。首先,本论文在综述
油品性质快速检测是炼化企业生产的重要环节,是稳定生产、优化资源利用率、提升炼化企业生产效益的关键。现有的油品性质快速检测方法还存在检测精度不高、稳健性不足等问题。本文研发基于近红外光谱的油品性质动态建模方法,设计异常样本判别方法,以及校正集自动维护技术,以提升油品性质检测精度和稳健性。本文首先综述了课题研究背景和现状,并总结油品性质近红外快速分析存在的问题。第二章研究了一种基于局部偏最小二乘法的油
金属杂芳香化合物是传统的芳香化合物中的CH基团被过渡金属及其配体取代而得到的新型金属有机化合物,由于其在光,电,磁学等方面具有潜在特殊的性质而日益引起科学家的关注。
税收机构改革作为2018年全国两会政府机构改革的构成部分,是自1994年推行分税制后,我国税收系统分化和税收部分由统一走向分立,又由分立走向合作与合并的过程。国地税合并作为税收机构改革的核心内容,旨在将省级与省级以下国地税部门合并,实现国家税务总局与省级政府联动的税收领导体制变革。2018年《深化党和国家机构改革方案》正式将国地税合并作为深化国家税收领改革、调节税收征管机制、调控央地财政的制度手段
Seismological monitoring of gravitational mass movements is considered an emerg-ing field in earth and environmental sciences,allowing for the remote detection,