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目的:乙型肝炎病毒(hepatitis Bvirus,HBV)感染是肝脏疾病主要病因之一,目前全世界HBV感染的人数超过3亿5千万人;microRNA-122是肝脏的特异性microRNA(miRNA),占全部肝内miRNA的70%,既往研究表明miRNA-122能调控HBV的复制。本研究中,我们将检测慢性HBV感染者血清病毒学指标、肝功及血清miRNA-122以及完善肝脏组织学活动指数(histologic activity index,HAI)及纤维化分期的评分,明确血清miRNA-122表达水平与HBVDNA、ALT、炎症坏死程度及纤维化程度的相关性,HBeAg阳性与HBeAg阴性患者血清miRNA-122表达水平的差异,以及慢性HBV携带者、慢性乙型肝炎患者及乙型肝炎肝硬化患者血清miRNA-122表达的水平的差异,为探讨血清miRNA-122的意义提供新的依据。
方法:
一、研究对象
1、实验组
选择2011-2012年盛京医院感染科接受肝穿病理检查的慢性HBV感染者作为研究对象,共62人,其中男39人,女23人,平均年龄37.5±1.38岁,按疾病类型不同分为三组,慢性HBV携带者组14人,慢性乙型肝炎34组人,乙型肝炎肝硬化组14人,收集他们临床检验后废弃的血清标本,用于本次实验指标的检测。
2、对照组
选择2012年9月于盛京医院化验检查的体检者作为健康对照组,共11人,男6人,女5人,平均年龄35±1.87岁,收集他们临床检验后废弃的血清标本,用于本次实验指标的检测。
二、检测方法
1、HBVDNA载量采用COBAS Ampliprep& COBAS Taqman48全自动实时荧光定量PCR系统检测;HBeAg半定量及HBsAg定量采用化学发光微粒子免疫检测法检测;ALT采用还原性辅酶法检测;血清miRNA-122使用mirVana PARIS Kit提取后采用stem-loop qRT-PCR方法检测。
2、肝脏组织学活动指数(histologic activity index,HAI)及纤维化分期采用Ishak准则评分。
结果:
实验组血清miRNA-122表达水平显著高于健康对照组(P<0.001),实验组中慢性HBV携带者组表达水平最高(P<0.001),慢性乙型肝炎与肝硬化组比较血清miRNA-122表达水平无显著差异(P=0.852)。慢性HBV感染者HBeAg阳性组血清miRNA-122表达水平显著高于HBeAg阴性组(P=0.002);慢性乙型肝炎组及肝硬化组患者按HBeAg阳性与否分组,两组患者血清miRNA-122表达水平无显著差异(P=0.216);血清miRNA-122表达水平分别与HBVDA、ALT、HAI评分及HBeAg水平显著相关(r=0.377,P=0.003;r=-0.275,P=0.040;r=-0.344,P=0.007;r=0.351,P=0.039),炎症坏死程度不同(HAI<3,3≤HAI<6,HAI≥6)血清miRNA-122表达水平有显著差异(P=0.015);血清miRNA-122表达水平与纤维化程度无相关性(P=0.131),纤维化程度不同(F<3,F≥3)血清miRNA-122表达水平无显著差异(P=0.246);
结论:
1、慢性HBV感染者血清miRNA-122的表达水平显著高于健康者,其中慢性HBV携带者血清miRNA-122的表达水平最高,慢性乙型肝炎患与肝硬化患者比较血清miRNA-122的表达水平无显著差异;
2、慢性HBV感染者血清miRNA-122的表达水平随着炎症程度加重而逐渐降低;