【摘 要】
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目的:乳腺癌发病率在女性恶性肿瘤中居首位。乳腺癌的分子机制尚未完全清楚,且临床上缺乏有效的监测指标。近年研究发现,miR-324-5p与各种肿瘤的发生发展有关,但miR-324-5p与乳腺癌进展的具体关系以及是否可作为乳腺癌诊断与预后的指标,尚无明确结论。本文研究miR-324-5p与乳腺癌细胞增殖迁移的关系,探究miR-324-5p在乳腺癌患者组织和血清中的表达,分析其与临床病理特征的关系,进一
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目的:乳腺癌发病率在女性恶性肿瘤中居首位。乳腺癌的分子机制尚未完全清楚,且临床上缺乏有效的监测指标。近年研究发现,miR-324-5p与各种肿瘤的发生发展有关,但miR-324-5p与乳腺癌进展的具体关系以及是否可作为乳腺癌诊断与预后的指标,尚无明确结论。本文研究miR-324-5p与乳腺癌细胞增殖迁移的关系,探究miR-324-5p在乳腺癌患者组织和血清中的表达,分析其与临床病理特征的关系,进一步探索其对乳腺癌诊断和预后的临床价值。方法:我们利用细胞计数试剂盒-8（CCK-8）实验和平板克隆实验评估miR-324-5p对乳腺癌细胞增殖能力的影响,划痕实验和Transwell实验评价miR-324-5p对乳腺癌细胞侵袭和迁移能力的影响。通过实时定量聚合酶链反应（RT-qPCR）检测38对乳腺癌及癌旁组织和100例患者血清及50例正常健康人血清样本中miR-324-5p的表达,分析其与乳腺癌临床病理特征的相关性。miR-324-5p的诊断价值使用受试者工作特性（ROC）曲线评估。Kaplan-Meier方法及COX回归分析乳腺癌血清miR-324-5p的表达与乳腺癌无进展生存期（DFS）和总生存期（OS）的关系,评估预后价值。结果:1.在乳腺癌细胞MCF-7、Hs578T和T-47D中,miR-324-5p的表达与人乳腺上皮细胞MCF-10A相比显著增加（p＜0.01）。2.MCF-7和Hs578T细胞转染miR-324-5p mimic和inhibitor后,RT-qPCR验证了转染效果。过表达miR-324-5p可促进MCF-7细胞的增殖能力（p＜0.001）,干扰miR-324-5p可抑制Hs578T细胞的增殖能力（p＜0.01）。3.伤口愈合实验和Transwell实验证实上调miR-324-5p可刺激MCF-7细胞的侵袭迁移能力（p＜0.01）,而抑制miR-324-5p表达的Hs578T细胞具有相反的效果（p＜0.01）。4.以癌旁组织为对照,38例乳腺癌组织样本中有31例miR-324-5p的相对表达水平增加（p＜0.05）。此外,与早期（I期和II期）的乳腺癌患者相比,miR-324-5p水平在晚期（III期和IV期）的乳腺癌患者中表达更高（p＜0.01）。5.与50例健康人血清相比,100例乳腺癌血清样本中miR-324-5p的表达相对升高（p＜0.001）。血清miR-324-5p表达水平对乳腺癌的诊断能力AUC值为0.7557（95%CI:0.6797–0.8317）,具有良好的敏感性（71%）和特异性（74%）。6.在乳腺癌临床病理特征相关分析中,miR-324-5p的表达与年龄（p=0.0278）和TNM分期（p=0.0291）显著相关,而与肿瘤大小（p=0.8412）、淋巴结转移（p=0.3093）、ER（p＞0.9999）、PR（p=0.1512）或HER状态（p=0.1614）、肿瘤类型（p=0.6396）等无关。7.在生存分析中,miR-324-5p表达低的患者往往有更长的无进展生存期（p=0.0115）和总生存期（p=0.0073）。此外,miR-324-5p（HR:2.256,95%CI:1.06-4.802,p=0.039）、TNM分期（HR:3.05,95%CI:1.421-6.548,p=0.004）和PR（HR:0.454,95%CI:0.225-0.915,p=0.027）与无进展生存期显著相关。miR-324-5p（HR:2.633,95%CI:1.025-6.766,p=0.044）、TNM分期（HR:3.309,95%CI:1.414-7.743,p=0.006）和PR（HR:0.423,95%CI:0.187-0.96,p=0.04）与总生存期显著相关。结论:1.体外功能试验结果显示miR-324-5p可以促进乳腺癌细胞的增殖、侵袭和迁移。2.血清miR-324-5p水平对乳腺癌的诊断价值AUC值0.7557,具有良好的敏感性（71%）和特异性（74%）。3.miR-324-5p表达低的患者有更好的无进展生存期和总生存期,是乳腺癌一个独立的预后因素。
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