二色胡枝子（Lespedeza bicolor）是一种多年生落叶灌木,适应性、抗逆性强,是优良的豆科植物饲料灌木,还有多种经济开发价值。4-香豆酸-辅酶A-连接酶（4CL）是木质素合成过程中的关键酶,反义转入4CL基因可降低一些植物的木质素含量。降低木质素含量,对于改善胡枝子饲料品质具有重要的现实意义。本论文研究了二色胡枝子遗传转化中诸多影响因素,优化了遗传转化体系,并将反义4CL基因导入到二色胡枝子中。主要研究结果如下:1、抗生素敏感性:在子叶节转化筛选阶段,卡那霉素或G418的适宜浓度分别为20和7.5mg/L;在抗性芽增殖培养时,卡那霉素或G418浓度分别为150mg/L和15mg/L在生根阶段,卡那霉素或G418浓度分别为20mg/L和5mg/L;而头孢霉素在各阶段适宜浓度为0～300mg/L;头孢霉素对农杆菌LBA4404和C58抑制浓度为200～300mg/L时效果理想。2.遗传转化体系的建立与与优化:二色胡枝子子叶节转化试验中,对外植体进行预培养48h的处理,农杆菌C58浓度OD₆₀₀=0.4～0.6范围内浸泡20～25分钟,共培养时间2d转化效率较高;延迟选择3d可以提高二色胡枝子子叶节的转化效率。3.转基因植株分子生物学鉴定与形态观察:对转基因植株的进行了PCR、PCR-Southern和Southern检测,证实外源基因已插入二色胡枝子基因组中,并得到了两个抗性株系。转基因株系胸径变粗生长量增加,株型正常,叶色正常,但单叶的叶面积变大。生长速度明显慢于对照。Wiesner反应发现转基因与非转基因植株间苯三酚染色后有明显差异,由此表明转化植株木质素总含量有所下降。